刘猛，樊凤娇，石璞洁，涂茂林，于翠平，杜明，，*

（1.哈尔滨工业大学化学与化工学院，黑龙江哈尔滨150090；2.大连工业大学食品学院，辽宁大连116034）

不同浓度牛乳铁蛋白对成骨细胞与破骨细胞共培养的影响

刘猛1，樊凤娇1，石璞洁1，涂茂林1，于翠平2，杜明1，2，*

（1.哈尔滨工业大学化学与化工学院，黑龙江哈尔滨150090；2.大连工业大学食品学院，辽宁大连116034）

研究证实牛乳铁蛋白具有成骨活性功能，既能刺激成骨细胞增殖，也能诱导破骨细胞凋亡。骨骼的生长发育是一动态平衡的生物过程，是通过成骨细胞诱导的骨生成和破骨细胞诱导的骨吸收所调节的。采用成骨细胞MC3T3-E1细胞与破骨前体细胞RAW264.7细胞1∶1的比例直接接触的共培养方式，研究不同浓度（20、100、500μg/mL）的牛乳铁蛋白对共培养中成骨细胞和破骨细胞活性以及破骨细胞骨吸收功能的影响。首先，通过碱性磷酸酶（ALP）活性检测试剂盒检测共培养上清中的ALP活性，发现低浓度的牛乳铁蛋白能够抑制成骨细胞的ALP活性，而中高浓度的牛乳铁蛋白能够显著地促进成骨细胞的ALP活性。利用TRAP活性检测试剂盒及ELISA检测试剂盒，则发现低中浓度的牛乳铁蛋白能够促进破骨细胞的TRAP活性，而高浓度的牛乳铁蛋白能够显著地抑制破骨细胞的TRAP活性和共培养体系RANKL/OPG的比值。最后，通过骨吸收陷窝实验，证实了中高浓度组的牛乳铁蛋白能够显著地抑制破骨细胞的骨吸收功能。结果表明了高浓度的牛乳铁蛋白在共培养体系中不仅能够促进成骨细胞的活性，并且对破骨细胞具有抑制活性及功能的作用。……