徐蕙 侯晓燕

革兰染色法在阴道分泌物真菌检测中的应用研究

徐蕙 侯晓燕

目的探究阴道分泌物真菌检测中应用革兰染色法的效果。方法选取我院收治的阴道炎患者130例作为研究对象，将其随机分为观察组（65例）和对照组（65例）。对照组采用生理盐水检验，观察组采用革兰染色法检验。分析两组真菌检验数据，进行统计学分析。结果观察组的检验结果优于对照组，组间数据对比，差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论革兰染色法检测阴道分泌物真菌，检测的阳性率高，效果较好。

革兰染色法；阴道分泌物；真菌检测；应用研究

女性疾病已经成为一种较为普遍的病症，阴道炎是其中病症之一，引起妇科疾病的主要原因是由于各种致病菌的感染。常见的病症临床变现为阴道瘙痒、阴道分泌物异常、外部灼痛感，疾病严重的会影响性生活[1]。检测阴道炎方法居多，常用一种既方便又快速的，被称为阴道分泌物涂片的方法。虽然得出结果的效率高，但是比较容易受到影响，所以增加了发现分泌物的真菌感染难度，因此导致检验结果检出的真菌率低、敏感性低，会出现漏诊、误诊的现象，使患者的病情得不到及时治疗[2]。正因此现象的产生，在临床上治疗阴道炎患者的关键性是选取合适的检验方法，并作为课题进行研究。近几年来，随着经济发展迅速，医疗技术不断进步，在研究阴道分泌物的检验方面也有了新的突破。经过大量研究表明，一种方法既能够提高阴道分泌物真菌的检出率又可以提高敏感性的是革兰染色法，而且还可以提供安全有效的数据，作为临床上妇科疾病的诊断依据，效果良好[3]。我院选取了阴道炎患者，研究革兰染色法在阴道分泌物真菌检验中的应用，开展了本次实验。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2015年8月—2016年8月收治的阴道炎患者130例作为研究对象。所有患者必须符合阴道炎症状的诊断，并且实验是在患者和患者的家属知情同意的情况下完成的。将130例患者随机分成两组，观察组（65例）与对照组（65例）。观察组患者的平均年龄为（41.7±5.3）岁，住院时间5～15天；对照组患者的平均年龄为（41.1±5.6）岁，住院时间4～15天。两组患者的一般资料对比，差异不具有统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 对照组 采用生理盐水的方法检验：用无菌的棉拭子在生理盐水中浸润，然后将其放入阴道中，获取阴道分泌物之后均匀涂抹在载玻片上进行镜检。

1.2.2 观察组 采用革兰染色的方法检验：同对照组将无菌的棉拭子在革兰中浸润，然后放入阴道中，获取阴道分泌物后均匀涂抹在载玻片上，首先进行过火固定，然后开始染色（初染、媒染、脱色、复色），最后在油镜下检验。初染：滴数滴草酸结晶紫到载玻片上，摇匀至覆盖标本，染色1 min后用大量清水冲洗；媒染：接着上一步在得到的标本上滴加数滴碘液直至标本被完全覆盖，染色1 min后用大量清水冲洗，把多余的水分用吸水纸吸掉；脱色：用媒染得到的标本滴入酒精脱色液，晃动使载玻片充分脱色，1 min后大量清水冲洗，把多余的水分用吸水纸吸掉；复染：将脱色得到的标本加沙黄染色液至完全覆盖，静置15 s后，用大量清水冲洗，把多余的水分用吸水纸吸掉，干燥后镜检。

1.3 评价疗效标准

本实验有两种实验结果，一种为阳性，另一种为阴性。阳性结果为：出现孢子或真菌菌体；反之为阴性。并将两种方案的阳性率进行统计学比较。

1.4 统计学分析

采用SPSS 20.0软件对数据进行分析处理，计量资料以（均数±标准差）表示，采用t检验；计数资料以（n，%）表示，采用χ2检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

观察组的检验结果优于对照组，组间数据对比，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

3 讨论

从生态系统方面来讲，女性阴道也属于一个生态系统，是一个复杂的微生物生态系统，原因是多种微生物存在于女性阴道中，生态系统处于一种平衡的动态之中，这些微生物也不例外[4]。不过随着女性年龄、妊娠的改变，处于平衡状态的微生物会发生比例的变化。正常的阴道pH值范围在4.0～4.5之间，健康的菌群中乳酸杆菌是优势菌，比例达到阴道微生物的90%以上。但是由于后期使用抗生素期限过长，并且自身的免疫力不足等因素会引起乳酸菌的大量死亡，一旦出现此现象，会引起菌群比例失调，真菌繁殖会增快，进而引起阴道炎[5]。真菌性感染引起妇女阴道的发病率高，而且假阴性的主要主观因素是由于真菌的数量少或者孢子的形态变化比较大，因此误导检验者难以正确辨别光滑念珠菌、热带念珠菌等变异性较多的真菌[6]。近年来，随着抗菌药物的大量使用以及滥用，造成细菌的多重耐药性以及继发的双重感染，因此导致临床治疗的困难难度大大增加。在医生没有给出明确的治疗方法时，不能凭着自己的经验用药，且随便加大用药量，否则会导致失调的菌群失调加重，影响治疗效果。

表1 两组患者真菌检验结果比较 [n（%）]

诸多学者针对以上现象提出治疗方法，设置阴道分泌物的常规检查方法，即为革兰染色法。虽然革兰染色法步骤比生理盐水法繁琐，但是革兰染色法可以同时检查多项目，尤其是对淋球菌、加德纳菌及其他条件致病菌检测的敏感性高[7-8]。临床上推广应用染色法，可以提高检验结果的准确性，并且把医生滥用抗生素的可能性降低，同时为医生合理有效地诊疗提供必需的实验室依据，既可以及时解决患者的痛苦，不仅缓解了患者的家庭关系，还可以受益于社会和经济效益。上述介绍到严重性的妇科病会影响夫妻间的生活，运用染色法可以降低误诊率，明确诊断，减少诊疗时间，为患者减轻痛苦。为了防止漏诊，对于用生理盐水直接镜检的可疑标本理应再次进行革兰染色法检测。本次研究结果表明：观察组的检验结果优于对照组，组间数据对比，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，观察组应用革兰染色法应在阴道分泌物真菌检验的效果优于对照组，在临床检验应用上值得推广。本研究存在的不足之处在于：观察对象量小，随访时间短，不能够作为有力的依据，需要进一步观察。

[1]吴瑞民，李朝献，李妤蓉．5种快速方法检测真菌孢子的比较[J]．国际检验医学杂志，2015，36（9）：1257-1258．

[2]余算．基层医疗机构对滴虫性、真菌性阴道炎最适检验方案的临床观察 [J]．中国微生态学杂志，2014，26（11）：1338-1341．

[3]张秋菊，赵德华，贾莉婷，等．31 848例阴道分泌物检查结果分析 [J]．中国妇幼保健，2014，29（18）：2886-2888．

[4]王晓娜，李康怡，王岩，等．阴道分泌物清洁度亚级别的建立及分级标准的探讨[J]．中国微生态学杂志，2015，27（10）：1214-1217．

[5]王天琼，何玉，罗静，等．瑞氏染色法对悬浮法检测阴道分泌物结果的质控分析 [J]．临床检验杂志，2015，33（3）：230-231．

[6]彭文清，谢志强．假丝酵母菌性阴道炎的菌种分类及耐药性监测[J]．中华医院感染学杂志，2013，23（6）：1467-1469．

[7]梁向华，张丽丽，赵芳，等．阴道微生物对经阴道盆腔手术的影响 [J]．中国医药，2015，10（7）：1035-1037．

[8]彭芬，刘行超，曾桂芬．唾液酸酶法检测对细菌性阴道病的诊断价值 [J]．国际检验医学杂志，2013，34（2）：197-198．

Study on the Application of Gram Staining Method in Fungal Examination of Vaginal Discharge

XU Hui HOU Xiaoyan Department of Clinical Laboratory, Zaozhuang Maternal and Child Health Care Hospital, Zaozhuang Shandong 277100, China

ObjectiveTo explore the effect of Gram staining method in fungal detection of vaginal secretions.Methods130 cases of vaginitis patients in our hospital were selected as the research objects, and they were randomly divided into observation group (65 cases) and control group (65 cases). The control group was examined by physiological saline,the observation group was examined by Gram staining method. Fungal examination data of two groups were analyzed, and statistical analysis was conducted.ResultsThe results of the observation group were better than those of the control group, and the difference between the two groups was statistically significant (P＜0.05).ConclusionThe detection of vaginal fungal leather blue staining method, the positive detection rate is high, the effect is significant.

Gram staining method; vaginal discharge; fungi detection;application study

R711

A

1674-9308（2017）25-0036-03

10．3969/j．issn．1674-9308．2017．25．019

枣庄市妇幼保健院检验科，山东 枣庄 277100