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5 株樱桃果实采后病原真菌分离及rDNA ITS区序列分析

2017-11-13黄津津任向峰何欣萌王友升

食品科学 2017年22期

姚 婷,黄津津,任向峰,张 燕,何欣萌,王友升*

(北京食品营养与人类健康高精尖创新中心,食品质量与安全北京实验室,北京工商大学,北京 100048)

5 株樱桃果实采后病原真菌分离及rDNA ITS区序列分析

姚 婷,黄津津,任向峰,张 燕,何欣萌,王友升*

(北京食品营养与人类健康高精尖创新中心,食品质量与安全北京实验室,北京工商大学,北京 100048)

从采后贮藏过程中自然发病的“拉宾斯”、“红灯”樱桃果实中分离到5 株丝状病原真菌319#、323#、367#、369#和370#。对分离得到的菌株纯化、回接、再分离纯化,并观察菌落形态和个体形态。提取5 株病原真菌DNA,PCR扩增rDNA ITS区序列后测序,分析测序结果并构建进化树。综合形态学特征和rDNA ITS区序列鉴定分析结果,得到菌株319#为匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)、菌株323#为苹果果腐病菌(Diaporthe perniciosa)、菌株367#为黑附球菌(Epicoccum nigrum)、菌株369#为核果褐腐病菌(Monilinia laxa)和菌株370#为圆孤青霉菌(Penicillium cyclopium),其中D. perniciosa、E. nigrum和P. cyclopium为在樱桃果实上首次分离到的病原真菌。

樱桃;病原真菌;形态学观察;rDNA ITS区序列分析

樱桃(Cerasus pseudocerasus)果实富含维生素、钙、铁、磷及钾等多种元素,营养丰富,深受消费者喜爱,但由于樱桃皮薄多汁,果实在采后贮藏过程中易受微生物侵染而发生品质裂变[1-2]。据报道,导致樱桃果实采后贮藏期间腐烂损失严重的病原真菌有灰霉病菌(Botrytis cinerea Pers. ex Fr.)引起的灰霉病、匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)引起的软腐病、链核盘菌(Monilinia sp.)引起的褐腐病、扩展青霉(Penicillium expansum)引起的青霉病和链格孢菌(A lternaria alternata)引起的交链孢霉腐病等[3-4]。目前对引起樱桃采后病害的其他病原微生物,国内外鲜有报道。

rDNA基因内转录间隔区(in ternal transc ribed spacer,ITS)存在保守序列和可变序列,利用可变区分化程度高、变异性强的特点可从分子水平上解决真菌分类鉴定及进化水平上的差异性问题[5-7]。……

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