特异性干扰survivin基因表达对人舌癌Tca8113细胞体外增殖和侵袭性的影响①
2017-09-21母润红刘永超王湘茗
母润红 马 方 刘永超 王湘茗
(北华大学基础医学院,吉林132011)
特异性干扰survivin基因表达对人舌癌Tca8113细胞体外增殖和侵袭性的影响①
母润红 马 方 刘永超 王湘茗
(北华大学基础医学院,吉林132011)
目的:探讨应用RNAi技术特异性沉默survivin基因表达对人舌癌细胞Tca8113增殖、凋亡、迁移的影响,阐明survivin在Tca8113细胞生物学行为中的作用。方法:取对数生长期的Tca8113细胞,分为干扰组、阴性对照组及空白对照组。采用RT-PCR和Western blot方法检测Tca8113细胞中survivin基因的mRNA及蛋白的表达水平;MTT法检测细胞的增殖状况;流式细胞术检测各组Tca8113细胞凋亡率;划痕实验检测Tca8113细胞的迁移状况。结果:RT-PCR 显示舌癌Tca8113细胞中survivin 的mRNA表达水平明显低于空白对照组 (P<0.05),Western blot 蛋白免疫印迹结果显示,与空白对照组比较,survivin蛋白表达水平减少(P<0.05)。survivin干扰组Tca8113细胞的增殖能力降低(P<0.05);细胞划痕实验发现转染Tca8113细胞48 h 后干扰组细胞的迁移距离明显短于空白对照组(P<0.05)。结论:特异性沉默siRNA-survivin的表达可有效抑制舌癌Tca8113细胞的体外迁移能力,可能与survivin表达减少有关,有望成为口腔舌癌生物治疗的潜在靶点。
survivin;siRNA;增殖;凋亡;迁移
鳞状细胞舌癌是口腔颌面部常见的恶性肿瘤,其特点是局部浸润生长及易发生颈部淋巴结转移。发生淋巴结转移患者的预后较差,颈淋巴结转移是导致舌鳞癌患者死亡的重要因素之一[1]。survivin基因是凋亡抑制蛋白家族(Apoptosis inhibitor protein,AIP)成员中分子量最小的一个,是迄今为止发现的最强凋亡抑制因子[2]。survivin在胚胎组织中及大多数的肿瘤组织中特异性表达,而在正常组织中低表达或不表达。survivin的高表达与肿瘤的复发、淋巴浸润及转移相关,常与患者的预后不良以及对化学治疗不敏感有关[3]。近年研究发现survivin基因与舌癌发生发展密切[4]。但其内在机制尚不清楚。本研究中,我们通过RNAi的方法,特异性干扰人舌癌细胞株Tca8113细胞中survivin基因的表达[5,6],探讨survivin基因在人舌癌发生发展中所发挥的作用,寻找抑制舌癌增殖、侵袭和转移新的治疗靶点。……
