江杨帆 刘雪兰 叶 红

(安徽省医学科学研究院，合肥230061)

VP3的细胞定位及其诱导乳腺癌细胞凋亡效应研究①

江杨帆 刘雪兰②叶 红

(安徽省医学科学研究院，合肥230061)

目的：研究鸡传染性贫血病毒VP3基因在正常细胞和乳腺癌细胞中不同时间段的定位及其诱导细胞凋亡效应的变化。方法：用PCR方法扩增鸡贫血病毒的VP3基因，克隆至绿色荧光载体pEGFP-C1，构建含VP3的基因重组体，利用FuGENE®6 Reagent将pEGFP-C1-VP3分别转染乳腺癌MCF-7和成纤维细胞L929，观察VP3转染24、48、72 h后的细胞定位，并用流式细胞术检测MCF-7不同时间段的细胞凋亡率。结果：VP3融合蛋白定位于乳腺癌细胞MCF-7核内，并呈现细胞凋亡不同阶段的典型核改变，VP3融合蛋白在L929细胞中经历了由核内迁移到细胞质的变化过程，不引起L929细胞凋亡。结论：VP3在乳腺癌细胞MCF-7中定位于细胞核，并能以诱导凋亡的方式引起癌细胞的死亡，并且凋亡率高于对照组且具有时间依赖性；VP3在正常细胞中定位于细胞质，且不引起凋亡效应。

鸡贫血病毒；VP3基因；细胞定位；凋亡

鸡传染性贫血(Chicken infectious anemia,CIA)，是由鸡传染性贫血病毒引起的一种传染病，病鸡造血器官和淋巴器官受损，出现再生障碍性贫血和免疫抑制，因此加重或导致其他疾病。凋亡素(Apoptin)是由禽贫血病毒(Chicken infectious anemia virus，CIAV)中VP3基因编码的一种功能蛋白，研究发现VP3有明显的致肿瘤细胞凋亡作用，而对人的正常二倍体细胞无毒副作用，且这种选择性凋亡作用既不依赖于p53蛋白介导，也不被Bcl-2的过表达所抑制，故考虑其可被广泛应用于抗癌的基因治疗[1-3]。本……