何樱，黄维甄，欧阳考滨，袁霞

(惠州市中心人民医院，广东惠州 516000)

结直肠癌患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化状态观察

何樱，黄维甄，欧阳考滨，袁霞

(惠州市中心人民医院，广东惠州 516000)

目的 观察结直肠癌(CRC)患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化状态。方法 CRC患者50例(肿瘤组)、结直肠良性病变者50例(良性组)、健康体检者50例(正常组)，采用甲基化特异度PCR的方法检测各组粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化检出率，并分析其与CRC临床病理参数的关系。根据肠镜病理诊断结果进行验证，比较粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A单独及联合检测诊断CRC的敏感度和特异度。结果 肿瘤组、良性组、正常组粪便p16INK4a基因甲基化检出率分别为74%、28%、14%，MGMT基因甲基化检出率分别为56%、24%、12%，RASSF1A基因甲基化检出率分别为72%、20%、10%，肿瘤组分别与正常组、良性组比较，P均<0.05。p16INK4a基因甲基化状态与CRC分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关，MGMT基因甲基化状态与CRC淋巴结转移相关，RASSF1A基因甲基化状态与CRC分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关，P均<0.05。三者联合检测诊断CRC的敏感度为95.8%，特异度为83.4%，ROC曲线下面积为0.816(95%CI0.739%～0.894%)。结论 CRC患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化检出率明显高于结直肠良性病变者及健康体检者，联合检测上述指标有助于CRC患者的早期诊断及其生物学行为的判断。

结直肠癌；p16INK4a基因；MGMT基因；RASSF1A基因；基因甲基化

结直肠癌(CRC)是常见的恶性消化道肿瘤之一，有较高的发病率及病死率[1,2]。CRC早期未发生癌组织转移时患者5年生存率为90%，发生局部转移时患者生存率为68%，发生远处转移时患者生存率仅为10%[3～5]。早发现及早治疗能明显提高CRC患者的生存率[6]，近年发达国家的CRC患者5年生存率有所提高[7]。近年来，肿瘤的表观遗传学研究进展对CRC的诊断和治疗具有深远的意义[8,9]。有研究[10,11]表明，抑癌基因启动子区高度甲基化是抑癌基因失活的一个至关重要的机制。研究[12]发现，在多种肿瘤中均存在多个抑癌基因启动子甲基化水平明显升高，提示抑癌基因启动子甲基化水平能作为CRC诊断的分子标志物。自肿瘤组织中脱落的癌细胞及游离的DNA能稳定存在于CRC患者的粪便，因此提取粪便DNA、检查抑癌基因启动子甲基化水平能为CRC筛查提供新的可能[7]。……