沈俊炳

(诏安县质量计量检验检测所，福建 诏安 363500)



毛细管电泳电化学发光法检测鱼露中的L-羟脯氨酸含量

沈俊炳*

(诏安县质量计量检验检测所，福建 诏安 363500)

毛细管电泳；电化学发光；吡啶钌；L-羟脯氨酸；鱼露

L-羟脯氨酸(L-Hydroxyproline)，化学名为反-4-羟基-L-脯氨酸(trans-4-Hydroxy-L-proline)，分子式为C5H9NO3，分子量为131.13，是一种亚氨基酸。L-羟脯氨酸是胶原蛋白的特征氨基酸[1]，占正常胶原蛋白氨基酸总数的10%以上，但在其他普通蛋白质中含量极少[2]，因此被作为动物水解蛋白的指示性氨基酸[3]。通过检测食品中的L-羟脯氨酸含量的多少，就可以判定食品的加工过程中是否违法添加了动物水解蛋白以提高食品中的蛋白质含量[4-7]。鱼露是中国沿海地区及东南亚各国人民喜爱的传统调味料。它是利用低经济价值的鱼虾及水产加工的下脚料发酵制成的。传统工艺中鱼露发酵时间长，导致有部分不法生产者利用动物水解蛋白液配制鱼露，谋取暴利。通过检测鱼露中的L-羟脯氨酸含量并计算其占总氨基酸含量的比例，鉴别鱼露的真伪，具有重要的现实意义。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

实验仪器、试剂及检测样品同参考文献[16]。

1.2 实验方法

2 结果与讨论

2.1 检测池条件的优化

2.1.1 检测电位

图1 检测电位对ECL强度的影响(n=5)光电倍增管电压：800 V；溶解于50 mmol·L-1 pH 8.00的PBS)；进样条件：10 kV × 10 s；运行电压：15 kV；运行缓冲溶液：50 mmol·L-1 pH8.00的PBS；L-羟脯氨酸：50 mg·L-1。Fig.1 Effects of detection potential on ECL intensityPMT voltage: 800 V; Ru(bpy: 5 mmol·L-1(dissolved in 50 mmol·L-1 pH8.00 PBS); Injection parameters: 10kV×10 s; Running voltage: 15 kV; Running buffer solution: 50 mmol·L-1 pH8.00PBS;L-Hydroxyproline: 50 mg·L-1.

图浓度对ECL强度的影响(n=5)光电倍增管电压：800 V；检测电位：1.20 V；溶解于50 mmol·L-1 pH 8.00的PBS；进样条件：10 kV × 10 s；运行电压：15 kV；运行缓冲溶液：50 mmol·L-1 pH8.00的PBS；L-羟脯氨酸：50mg·L-1。Fig.2 Effects of Ru(bpy concentration on ECL intensityPMT voltage: 800 V; Detection potential: 1.20 V; Ru(bpy dissolved in 50 mmol·L-1 pH8.00 PBS; Injection parameters: 10 kV×10 s; Running voltage: 15 kV; Running buffer solution:50 mmol·L-1 pH8.00 PBS; L-Hydroxyproline: 50mg·L-1.

图3 缓冲溶液pH对ECL强度的影响(n=5)光电倍增管电压：800 V；……