邱峰,吴越,曹辉,华平,张尧,杜明洋,姜海波

·论著·

帕金森病异常表达microRNAs的筛选及microRNA-1976作用机制的初步研究

邱峰,吴越,曹辉,华平,张尧,杜明洋,姜海波

目的 筛选并验证与帕金森病相关的差异microRNA(miRNAs)，初步探讨miR-1976在帕金森病发展中的作用机制。方法 随机选取28例帕金森患者及对照组35例为研究对象。采用μParaflo®微流体芯片技术筛选与帕金森病相关的差异miRNAs，针对组间差异表达3倍以上、且组内差异小的8个miRNAs，进行实时PCR验证芯片重复性，并进一步构建miR-1976过表达慢病毒，通过电子显微镜及流式细胞仪检测miR-1976过表达组多巴胺能神经元细胞凋亡情况。结果 微流体芯片技术筛选出18个PD相关的差异表达miRNAs基因，表达差异3倍以上的8个基因是miR-1976、miR-153、miR-103a、miR-29a、miR-210、miR-375、miR-146a、miR-101a，miR-1976的表达差异最大，结果与miRNA芯片检测结果一致。miR-1976过表达组中发现凋亡小体形成，细胞凋亡率显著增加。结论 miR-1976是一个高差别表达的miRNA，具有促进多巴胺能神经元凋亡的功能，可能为帕金森病患者新的生物标志物。

帕金森病；miR-1976；多巴胺能神经元细胞；凋亡机制

帕金森病(PD)是一种因中脑黑质致密部多巴胺能神经元进行性变性、缺失导致CNS退行性疾病，尽管现有研究已在基因水平初步揭示了多巴胺能神经元凋亡的分子机制[1-2]，但以这些基因为干预靶标防治PD的效果并不十分理想。目前已确认microRNA(miRNA)分子在神经退行性疾病发生发展过程中发挥着极为重要的作用[3]，如过表达miR-16靶向淀粉样蛋白前体蛋白基因参与了Alzheimer’s病的病理相关机制[4]；而重度脊髓性肌萎缩患者血清中存在2个表达失衡的miRNA簇(miR-335-5p、miR-100-5p)等[5]。……