刘毅 张旭霞 张雨晴 李传友



·论著·

结核分枝杆菌三种蛋白在结核病血清学诊断中的评价研究

刘毅 张旭霞 张雨晴 李传友

目的 对结核分枝杆菌相对分子质量为38 000(以下采用38 kD表示)、线粒体通透性转换蛋白64 (mitochondrial permeability transition 64，MPT-64)和肝素结合血凝素(heparin-binding haemagglutinin，HBHA)蛋白在外周血中抗体的表达水平进行检测和比较，并对它们在结核病血清学方面的诊断价值进行评估。方法 选取2012年7月至2013年10月北京胸科医院收治的肺结核患者作为活动性肺结核(ATB)组，共78例；选取同期36例潜伏结核感染(LTBI)患者作为LTBI组；同期在北京胸科医院进行体检的31名健康人群(HC)作为HC组。将本实验室前期纯化的38 kD、MPT64和HBHA作为抗原应用于免疫学的检测，采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中三种蛋白抗体的表达水平，经过统计学处理后，分别比较ATB、LTBI和HC三组之间的差异，并结合受试者工作特征曲线计算各蛋白抗原的敏感度和特异度，评价三种蛋白血清抗体的临床诊断价值。结果 ELISA检测ATB组38 kD蛋白抗体的吸光度(A)450 nm处的A值(0.343±0.120)高于LTBI组(0.221±0.102)和HC组(0.143±0.097)，差异有统计学意义(t=3.07，P<0.05)； MPT64抗体的A450值(0.234±0.102)高于LTBI组(0.198±0.087)和HC组(0.123±0.075)，差异有统计学意义(t=3.79,P<0.05)；HBHA抗体的A450值(0.263±0.113)高于LTBI组(0.188±0.091)和HC组(0.148±0.078)，差异有统计学意义(t=2.70,P<0.05)。以38 kD、MPT64和HBHA蛋白抗体表达水平从LTBI组鉴别ATB组时的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.78、0.61和0.62，敏感度分别为71.79%、62.82%和52. 56%，特异度为72.22%、58.33%和69.44%；从HC组鉴别ATB组时的AUC分别为0.91、0.81和0.79，敏感度分别为87.17%、69.23%和73.08%，特异度为80.65%、74.19%和74.19%；从HC组鉴别LTBI组AUC分别为0.63、0.75和0.69，敏感度分别为58.33%、77.78%和63.89%，特异度为64.52%、51.61%和74.19%。结论 MTB 38 kD、MPT64和HBHA蛋白都有较好的免疫反应性，3种蛋白抗体在不同患者人群血清中的表达水平有差异，对肺结核诊断价值的评估结果表明采用ELISA对外周血中MTB蛋白抗体进行检测可作为结核病临床检测诊断的辅助方法。

分枝杆菌，结核； 细菌蛋白质类； 酶联免疫吸附测定； 抗体； 血清学试验； 评价研究

结核分枝杆菌(MTB)基因组共编码约4000多种蛋白[1]，这其中有很多蛋白显示了较好的免疫原性和应用价值。这些蛋白包括MTB 相对分子质量为38 000(以下采用38 kD表示)蛋白, 线粒体通透性转换蛋白64 (mitochondrial permeability transition 64, MPT-64)和肝素结合血凝素(heparin-binding Haemagglutinin, HBHA)蛋白等。这三种蛋白可在结核病患者的感染和发病过程中诱发免疫反应，对其临床诊断价值的研究成为人们关注的焦点。……