李自慧 潘丽萍 孙琦 吕翎娜 杜博平 张洪静 孙照刚 张宗德



·论著·

结核分枝杆菌耐药相关基因扩增多重PCR体系的建立与评估

李自慧 潘丽萍 孙琦 吕翎娜 杜博平 张洪静 孙照刚 张宗德

目的 建立结核分枝杆菌耐药相关基因多重PCR反应体系，评估该体系以临床分离株DNA和痰菌DNA为模板扩增耐药相关基因的成功率。方法 常规提取结核分枝杆菌临床分离株(47株)及涂阳肺结核患者(21例)痰菌DNA。根据目前研究已发现的结核分枝杆菌耐药相关基因合成引物，建立2个多重PCR体系以扩增目的基因。扩增片段经测序证实后，计算该体系用于两种样本的扩增成功率。结果 针对临床常用8种抗结核药物，选取结核分枝杆菌rpoB、katG、inhA、embB、gyrA、rpsL、rrs、eis共8个耐药相关基因设计合成引物。建立2个多重PCR体系扩增8个耐药基因，该体系扩增47株结核分枝杆菌临床分离株DNA和21例菌阳肺结核患者痰菌DNA的成功率分别为100.0%(47/47)和76.2%(16/21)。结论 本研究建立了高效扩增8个结核分枝杆菌耐药基因的多重PCR体系，结果对进一步研发结核病耐药分子诊断产品具有重要意义。

结核, 抗多种药物性； 聚合酶链反应； 基因测定； 核酸扩增技术； 技术评估, 生物医学

结核病(tuberculosis，TB)是由结核分枝杆菌感染引起的一种严重威胁人类健康的传染性疾病。近年来耐药结核病的出现和传播使得全球结核病的防控进一步受到威胁。据估计全球约20%的结核分枝杆菌分离株至少耐一种主要的抗结核药物[1]，更严重的是耐多药结核病(multidrug-resistant tuberculosis，MDR-TB)、广泛耐药结核病……