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(1.扬州大学兽医学院,江苏扬州 225009;2.军事医学科学院，军事兽医研究所,省部共建吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室,吉林长春 130122; 3.温州大学病毒病研究所,浙江温州 325035)



乳酸菌破壁方法的比较研究

潘荣荣1,2,王茂鹏2,+,李昌2,3,邸洋2,荣凤君2,杜寿文2,朱羿龙2,刘立明3,朱国强1,*,金宁一2,3,*

(1.扬州大学兽医学院,江苏扬州 225009;2.军事医学科学院，军事兽医研究所,省部共建吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室,吉林长春 130122; 3.温州大学病毒病研究所,浙江温州 325035)

本实验旨在探索一种快速、高效、经济的乳酸菌破壁方法。通过甘氨酸破壁法、反复冻融破壁法、溶菌酶破壁法、氧化锆珠破壁法、超声波破壁法以及3种复合破壁法对植物乳杆菌Lactobacillus.plantarum1.557进行破壁处理,并以革兰氏染色和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)为评价方法,比较破壁效果和破壁时间的差异。此外,通过β-葡萄糖醛酸酶(GUS)活力的测定对氧化锆珠破壁法所提蛋白进行活性检测,通过琼脂糖凝胶电泳对氧化锆珠破壁法所提RNA的质量进行了检测。结果表明:氧化锆珠破壁法优胜于其他几种处理方法,该法所提取的 GUS蛋白具有蛋白活性,提取的RNA的OD260/OD280的比值在1.8～2.1 之间,符合标准的比值,纯度较高,降解程度低。因此,氧化锆珠破壁法适用于快速提取乳酸菌菌体蛋白和总RNA,它是一种快速、高效、经济的乳酸菌破壁方法。

乳酸菌,破壁方法,氧化锆珠,蛋白提取,RNA提取

乳酸菌是一类重要的工业菌株,被广泛应用于食品发酵,有着重要的经济价值。……