王庆武 兰玉菲 谢新国 安秀荣

（1泰安市农业科学研究院，山东泰安271000；2东平县州城镇农业综合服务中心，山东东平271506）

灵芝（Ganoderma lucidum）属担子菌纲，多孔菌目，多孔菌科，灵芝属，具有广泛的药理活性[1，2]。传统的灵芝栽培所用菌种为固体菌种，其生产劳动强度大、生长周期长、污染率高，降低了灵芝的生产效率[3]，制约了灵芝产业的发展。与固体菌种相比[4]，液体菌种具有生长速度快、菌龄一致、活力强、发菌快、成本低、生产效率高等优点，解决了固体菌种发菌慢、出芝不整齐和生产周期长的问题[3]，有利于提高灵芝产量和品质。

研究以菌丝生物量作为目的指标[5]，对碳源、氮源、无机盐等营养因子进行优化，旨在获得适宜灵芝液体菌种培养配方，为培育优质液体菌种提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试菌株 自主选育泰山赤灵芝菌株4914（原生质体单核杂交育种）。

1.1.2 母种培养基 马铃薯200 g（去皮煮汁），麸皮40 g（煮汁），葡萄糖20 g，KH2PO42 g，MgSO41 g，琼脂20 g，加水1000 mL。

1.1.3 一级摇瓶培养基 碳源优化基础培养基：蛋白胨0.2%，KH2PO40.1%，MgSO40.05%，花生油0.05%。

氮源优化基础培养基：葡萄糖2%，KH2PO40.1%，MgSO40.05%，花生油0.05%。

1.1.4 营养因子 碳源：葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、淀粉、玉米粉。

氮源：蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、（NH4）2SO4、NH4NO3、麸皮。

无机盐：KH2PO4、MgSO4·7H2O、CaSO4·2H2O。

1.2 试验方法

1.2.1 液体培养基制备 在250 mL三角烧瓶中加入150 mL液体培养基，0.11 MPa高压蒸汽灭菌30 min，冷却至室温无菌条件下接种。

1.2.2 接种培养方法 接入菌龄一致的5个4 mm2大小母种块，27℃恒温摇床培养，每处理重复3次。

1.2.3 碳源优化试验 在碳源基础培养基中，分别加入7种碳源，含量2%，组合成供试培养基，接种培养法参照1.2.2。……