李 慧 蔡 军 胡梦龙 傅 洋 欧静堃

（中粮营养健康研究院；营养健康与食品安全北京市重点实验室，北京 102209）

产黄曲霉毒素真菌多重PCR检测体系的建立

李 慧 蔡 军 胡梦龙 傅 洋 欧静堃

（中粮营养健康研究院；营养健康与食品安全北京市重点实验室，北京 102209）

依据标准SN／T 2582—2010《产黄曲霉毒素真菌PCR检测方法》推荐的产黄曲霉毒素调节基因aflR、柄曲霉素转甲氧基酶基因omt-1、杂色曲霉素A脱氢酶基因ver-1及真菌共有的5.8S rDNA的ITS序列分别设计4对特异性引物，对4对引物进行多重PCR反应体系构建与优化，建立快速检测产黄曲霉毒素真菌的多重PCR方法，并应用10株试验菌株对所建立的检测方法进行验证。结果表明，建立的多重PCR方法具有灵敏度高、特异性强、方便快捷的优点，为产黄曲霉毒素真菌快速检测试剂盒的研发及应用提供了重要技术保障。

多重PCR 产黄曲霉毒素真菌 快速检测 特异性 灵敏度

目前全球每年约有25%的农产品遭受真菌毒素污染，造成高达数百亿美元的经济损失［1］。对农业、畜牧业危害较严重的真菌毒素主要有黄曲霉毒素（AFT）、赭曲霉毒素A（OTA）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）、伏马毒素B（FB）和T-2毒素等［2-4］。其中，黄曲霉毒素对环境污染最严重、对人畜危害最大，能够广泛污染花生、玉米、大豆、小麦、坚果等农作物及其制品［5-6］。黄曲霉毒素来源于曲霉属、青霉属、毛霉属、镰孢霉属和根霉属等真菌［7］，曲霉属的黄曲霉（A．flavus）和寄生曲霉（A．parasiticus）是2种主要的黄曲霉毒素产生菌［8-9］。因此，能否及时有效地预防与控制黄曲霉毒素危害，首要条件就是能够快速准确地检测判断粮食是否被黄曲霉（A．flavus）、寄生曲霉（A．parasiticus）等产黄曲霉毒素真菌污染［10-11］。……