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应用高效液相色谱—二极管阵列检测器优化棉花体内多胺的测定方法

2017-02-15张一名��刘玲玲谢韫泽��孙艳香

江苏农业科学 2016年8期
关键词:高效液相色谱

张一名��+刘玲玲+谢韫泽��+孙艳香+冯雪��贾永红

摘要:应用高效液相色谱-二极管阵列检测器法(HPLC-DAD)对棉花体内多胺测定时的流动相比例及流速、多胺全光谱信息等进行分析,重点比较2种常用检测波长230、254 nm下的测定参数。最终确定检测波长为230 nm、流动相体积比V甲醇 ∶[KG-3]V水=80 ∶[KG-3]20、流速为0.6 mL/min为最佳色谱条件。该方法有较好的准确度、灵敏度,腐胺、亚精胺、精胺的回收率分别为98.58%、96.98%、99.62%,且非常稳定。以此色谱条件为基础测定棉花幼苗不同组织中多胺水平发现,叶片中3种多胺的含量明显高于根、茎组织;此外,不同组织内亚精胺含量最高。

关键词:棉花;幼苗组织;多胺含量;高效液相色谱;二极管阵列检测器

中图分类号: S562.01文献标志码:

文章编号:1002-1302(2016)08-0328-04

多胺(polyamines,PAs)是一类含有多个氨基的长链脂肪族化合物,广泛存在于生物体内。在植物代谢途径中,目前比较清楚的多胺形式主要有腐胺(putrescine,Put)、亚精胺(spermidine,Spd)、精胺(spermine,Spm)[1-2]。研究表明,多胺在植物体内是一类重要的生长调节因子,参与植物的细胞分裂[3-4]、性别分化[5]、果实成熟与衰老[6]、逆境适应[7-10]等重要生理过程。在分子水平的研究中还发现,多胺参与DNA的复制、转录、膜稳定、RNA和蛋白质的翻译[11]、DNA凝聚及激素的调控[12]等过程。另外,在人体中也存在大量多胺类物质,并与人类健康息息相关[13]。由于植物性食物是人体内多胺的重要来源之一[14],因此,如何准确而快速地检测植物组织中的多胺技术越来越受到人们的重视。

多胺的测定以前主要用氨基酸分析仪、纸电泳等方法[15-16],这2种检测方法样品回收率低,检测灵敏度也不高。……

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