卢晓平,许艳蕊,范秋苹，郝鲁江

(齐鲁工业大学山东省微生物工程重点实验室,山东济南 250353)



不同环境因子对海洋细菌PseudoalteromonasissachenkoniiHZ引导糖基转移酶基因表达的影响

卢晓平,许艳蕊,范秋苹，郝鲁江*

(齐鲁工业大学山东省微生物工程重点实验室,山东济南 250353)

为了研究海洋细菌PseudoalteromonasissachenkoniiHZ所产多糖的生物合成基因簇,首先需要克隆到在多糖合成中起关键作用的引导糖基转移酶基因。通过设计引物,采用PCR技术从海洋细菌PseudoalteromonasissachenkoniiHZ成功克隆到该基因,并通过实时荧光定量PCR技术检测了温度、pH及海盐浓度对引导糖基转移酶基因表达量的影响。结果表明:低温有利于引导糖基转移酶的表达,随着温度的上升,引导糖基转移酶基因的表达量先增后减,在20 h时,引导糖基转移酶的表达量急剧上升,15 ℃和35 ℃引导糖基转移酶表达量分别是20 ℃表达量的5.2倍、5.8倍;海盐浓度为4.5%时引导糖基转移酶的表达量为海盐浓度3.5%的2.5倍,海盐浓度为5.5%时引导糖基转移酶的表达量为海盐浓度3.5%的2.0倍;10 h时pH为8、9的培养基中引导糖基转移酶的表达量分别为pH为7的1.64和1.67倍。该结果为探究菌体环境适应性机制提供了一定的基础。

海洋细菌PseudoalteromonasissachenkoniiHZ,引导糖基转移酶,实时荧光定量PCR

海洋环境的特殊性,赋予海洋细菌所产多糖结构的多样性以及功能的特殊性。尽管已有大量文献报道海洋细菌多糖的特殊功能,但人们对于研究生产胞外多糖的海洋细菌的兴趣方兴未艾[1]。近几年,随着对微生物多糖研究的深入,世界上微生物多糖的产量和增长量均在10%以上,而一些新兴多糖年增长量在30%以上,到目前为止已经大量投产的微生物多糖有黄原胶、结冷胶、小核菌葡聚糖、短梗霉多糖等[2]。……