降解β-胡萝卜素双加氧酶的分离纯化及其部分酶学性质
2016-11-08郑坚强侯建光时锦锦彭新榜司俊玲
郑坚强,侯建光,2,时锦锦,赵 楠,彭新榜,司俊玲
(1.郑州轻工业学院食品与生物工程学院,河南郑州 450002;2.河南仰韶酒业有限公司,河南渑池 472400)
降解β-胡萝卜素双加氧酶的分离纯化及其部分酶学性质
郑坚强1,侯建光1,2,时锦锦1,赵楠1,彭新榜1,司俊玲1
(1.郑州轻工业学院食品与生物工程学院,河南郑州 450002;2.河南仰韶酒业有限公司,河南渑池 472400)
研究了西方许旺酵母菌发酵产生双加氧酶的分离纯化及其酶学特性,并利用该酶降解β-胡萝卜素生成香味物质。通过摇瓶发酵,并对粗酶液进行硫酸铵梯度沉淀、半透膜透析、DEAE-Sepharose离子交换和Sephadax G-100凝胶过滤等处理,得到转化β-胡萝卜素生成香气物质的双加氧酶。实验结果表明,西方许旺酵母菌发酵产生的双加氧酶被纯化了36.43倍,酶活力回收率为21.0%,分子量为55.0 ku。酶的最适温度为40 ℃,最适pH为8.5;金属离子对降解β-胡萝卜素双加氧酶活力的影响为:Fe2+>Mg2+>K+>Na+>Mn2+>Cu2+>Ca2+>Zn2+>Ag+。Fe2+和Mg2+能明显增强酶活力,而Zn2+和Ag+能抑制酶活力;SDS和胃酶抑素对酶活力有显著抑制作用。降解β-胡萝卜素双加氧酶的Km=8.24×10-4mol/L,Vmax=2.16×10-4mol/(min·mg)。
西方许旺酵母,双加氧酶,分离纯化,酶学性质
类胡萝卜素是链状或环状含有8个异戊间二烯单位、四萜烯类头尾连接而成的多异戊间二烯化合物,是一类不溶于水的色素,存在于植物和有光合作用的细菌中,在光合作用过程中起辅助色素的作用,其中β-胡萝卜素和番茄红素是常见的类胡萝卜素[1-2]。类胡萝卜素经过降解可以产生β-紫罗兰酮、二氢猕猴桃内酯和β-环柠檬醛等化合物,这些化合物具有花香和果香的风味……
