华承伟,于江傲,李　兰,常景玲,张志宏

(河南科技学院生命科技学院,河南新乡 453003)



拟青霉FLH30 β-葡萄糖苷酶动力学、激活抑制及其转糖苷

华承伟,于江傲,李兰,常景玲,张志宏

(河南科技学院生命科技学院,河南新乡 453003)

研究了拟青霉FLH30胞内β-葡萄糖苷酶动力学性质及葡萄糖、木糖和葡萄糖醛酸内酯对该酶的激活及抑制作用。结果表明:该酶对pNP-β-D-葡萄糖苷、pNP-β-D-半乳糖苷、纤维二糖、乳糖、龙胆二糖和水扬苷的水解动力学常数Km分别为0.54、5.28、0.98、26.34、6.92和1.72 mmol/L;在以对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)为底物时,5～150 mmol/L葡萄糖和20～600 mmol/L木糖对酶有激活作用,高于此范围,则表现出抑制作用,葡萄糖醛酸内酯具有很强的抑制作用,葡萄糖、木糖和葡萄糖醛酸内酯抑制常数Ki值分别为63.4、170.3和0.038 mmol/L。木糖能促进该酶对纤维二糖和乳糖的水解作用,木糖浓度为200 mmol/L时,酶活分别增加189.6%和166.3%。该酶还具有转糖苷活性,能够将纤维二糖部分转化为纤维三糖和龙胆二糖。

β-葡萄糖苷酶,动力学,激活,抑制,转糖苷

β-葡萄糖苷酶在食品、医药和化工行业具有广泛的用途[1],按其存在位置,可分为胞内和胞外β-葡萄糖苷酶。微生物的胞内β-葡萄糖苷酶为β-葡萄糖苷酶A,并与人体内的乳糖酶、根皮苷水解酶有高度的同源性,而胞外β-葡萄糖苷酶与β-葡萄糖苷酶B同源[2]。糖苷水解酶1家族的β-葡萄糖苷酶作用底物广泛,大部分β-葡萄糖苷酶对底物的糖基部分结构的专一性较差,能裂解C-O糖苷键、C-S键、C-N键、C-F键等;有些对糖基部分的C4和C2构形也不专一,能同时水解β-葡萄糖苷酶键和……