李红阳，王志勇，邱　　玙，艾晓林，郭　　利

（1.承德医学院，河北承德　067000； 2.承德医学院附属医院泌尿外科）

肌层浸润性膀胱癌患者BLCA-1含量的变化和临床意义

李红阳1，王志勇2△，邱玙1，艾晓林1，郭利1

（1.承德医学院，河北承德067000； 2.承德医学院附属医院泌尿外科）

目的：探讨肌层浸润性膀胱癌患者尿液和血清膀胱癌特异性核基质蛋白-1（bladder cancer specific nuclear matrix proteins-1，BLCA-1）含量的变化和意义。方法：采用竞争性ELISA法检测22例肌层浸润性膀胱癌患者、21例健康体检者和23例前列腺增生（BPH）患者尿液和血清BLCA-1的含量。结果：膀胱癌患者尿液BLCA-1的含量明显高于健康体检者和BPH患者（P＜0.01）； 膀胱癌患者血清BLCA-1含量明显高于健康体检者（P＜0.05），与BPH患者比较差异无统计学意义（P＞0.05）。膀胱癌患者血清BLCA-1含量与年龄和病理分级有关（P＜0.05）：≥60岁膀胱癌患者血清BLCA-1含量明显高于＜60岁膀胱癌患者，高级别膀胱癌患者血清BLCA-1含量明显高于低级别膀胱癌患者。膀胱癌患者检测尿液、血清BLCA-1敏感度（77.28% vs 56.37%）比较差异无统计学意义（P＞0.05）；检测尿液BLCA-1的特异度明显高于检测血清（93.18% vs 59.09%，P＜0.05）。结论：BLCA-1可能对肌层浸润性膀胱癌具有一定的诊断价值。

肌层浸润性膀胱癌；膀胱癌特异性核基质蛋白-1；ELISA；诊断

膀胱癌是我国泌尿系统疾病中最常见的恶性肿瘤之一，且发病率呈逐年上升趋势［1］。目前，找到一种方便快捷的膀胱癌肿瘤标志物以提高膀胱癌的早期诊断率已成为科研工作者们的首要目标。医学发展至今，膀胱镜检查加组织活检依然是膀胱癌诊断的金标准，但这种有创性操作并不适用于大规模的人群筛查。而传统的尿脱落细胞学检查敏感性低，并不是经济/效果比良好的指标，更适用于评估高风险人群［2］。目前研究发现［3］，膀胱癌特异性核基质蛋白-1（BLCA-1）在诊断膀胱癌方面具有较高的敏感性和特异性。本研究应用竞争性ELISA法检测了肌层浸润性膀胱癌患者、健康体检者和良性前列腺增生（BPH）患者血清和尿液中BLCA-1的含量，以探讨BLCA-1诊断膀胱癌的临床价值。

1　材料与方法

1.1一般资料初发肌层浸润性膀胱癌患者22例，男16例、女6例，年龄35-79岁，平均59±12岁；根据WHO 2004分级法，乳头状尿路上皮癌低分级6例、高分级16例；根据2009 TNM分期标准，T2 16例、T3 5例、T4 1例。 健康体检者21例，男10例、女11例，年龄21-66岁，平均41±14岁；BPH患者23例，年龄52-81岁，平均64±7岁。三组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法收集三组人群的静脉血和新鲜中段尿，4℃离心15min，取上清液-80℃保存待测。应用竞争性ELISA法检测样本BLCA-1的含量（人BLCA-1 ELISA试剂盒购自武汉华美生物工程有限公司）。

1.3统计分析采用SPSS 19.0统计软件分析数据，组间BLCA-1含量的比较采用单因素方差分析，血清、尿液BLCA-1特异度和敏感度的比较采用卡方检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1三组受试人群血清和尿液BLCA-1的含量膀胱癌患者尿液BLCA-1的含量明显高于健康体检者和BPH患者（P＜0.01）。膀胱癌患者血清BLCA-1含量明显高于健康体检者（P＜0.05），与BPH患者比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1：

表1　三组受试人群尿液、血清BLCA-1的含量（n=6±s ，单位：ng/ml）

表1　三组受试人群尿液、血清BLCA-1的含量（n=6±s ，单位：ng/ml）

与肌层浸润性膀胱癌患者比较：*P＜0.01，**P＜0.05

组别　n　　尿液　　血清肌层浸润性膀胱癌患者　22　1.48±1.71　6.62±3.42健康体检者　21　0.44±0.20*　3.52±1.03**BPH患者　23　0.71±0.36*　5.61±1.91

2.2肌层浸润性膀胱癌患者尿液、血清BLCA-1含量与膀胱癌临床病理指标的关系膀胱癌患者尿液BLCA-1含量与年龄、性别、临床分期、膀胱癌病理分级无关（P＞0.05）。膀胱癌患者血清BLCA-1含量与性别、临床分期无关（P＞0.05）；与年龄和病理分级有关（P＜0.05）：≥60岁膀胱癌患者血清BLCA-1含量明显高于＜60岁膀胱癌患者，高级别膀胱癌患者血清BLCA-1含量明显高于低级别膀胱癌患者。见表2：

表2　血清、尿液BLCA-1含量与膀胱癌临床病理指标的关系（n=6±s ，单位：ng/ml）

表2　血清、尿液BLCA-1含量与膀胱癌临床病理指标的关系（n=6±s ，单位：ng/ml）

参数　　例数　　尿液　　血清性别　　男　16　1.01±1.82　5.49±3.93女　6　1.53±1.00　7.94±2.85 P＞0.05　　＞0.05年龄（岁）　＜60　8　0.80±1.73　4.95±3.15≥60　14　1.50±1.68　7.94±3.63 P＞0.05　　＜0.05分期T2a T2b T3 T4 4 1 251 0.55±0.39 1.67±1.91 1.48±15.48 1.53±0.00 5.59±2.79 6.43±4.12 8.62±3.53 10.96±0.00 P＞0.05　　＞0.05分级低级别　6　0.73±0.14　4.50±3.08高级别　16　0.91±1.16　7.47±3.51 P＞0.05　　＜0.05

2.3肌层浸润性膀胱癌患者检测尿液、血清BLCA-1含量的特异性和敏感性cut-off值取0.921ng/ml时，检测尿液BLCA-1的敏感度和特异度分别为77.28%（17/22）和93.18%（41/44）；cut-off值取4.537ng/ml时，检测血清BLCA-1的灵敏度和特异度分别为86.37%（19/22）和59.09%（26/44）。膀胱癌患者检测尿液、血清BLCA-1敏感度比较差异无统计学意义（P＞0.05）；检测尿液BLCA-1的特异度明显高于检测血清（P＜0.05）。

3　讨论

膀胱癌作为泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，不断危害着人们的生命健康。中国医学科学院的统计显示，膀胱癌占中国恶性肿瘤的2.5%，且以4.6%的增长率逐年增长［4］。因此，早期诊断膀胱癌并采取及时、合理的治疗措施，动态监测复发，有效评估预后，一直是泌尿外科领域重要的研究方向。

核基质蛋白维持着细胞核的形态结构，其异常表达与肿瘤分化密切相关，具有显著的组织学、细胞学特异性，预示了其在诊断膀胱癌中的潜在价值［5］。1996年，Getzenberg等［6］成功提取了6种特异性表达于膀胱癌组织中的核基质蛋白，即BLCA-1-BLCA-6。2005年Myers-Irvin等［7］采用ELISA法检测了25例膀胱癌患者和46例对照者尿液BLCA-1的含量，结果显示其诊断膀胱癌的敏感度和特异度分别为80%和87%。

本研究发现，肌层浸润性膀胱癌患者尿液BLCA-1的含量明显高于健康体检者和BPH患者；22例膀胱癌患者中，17例患者尿液BLCA-1含量高于cut-off值，44例对照者（健康体检者和BPH患者）尿液BLCA-1含量有41例低于cut-off值，与国内外研究结果一致［3，6-7］。同时本研究发现，膀胱癌患者血清BLCA-1的含量明显高于健康体检者，与BPH患者比较无明显差异；虽然敏感度高达86.37%，但44例对照者中仅26例血清BLCA-1含量低于cut-off值，说明检测血清中BLCA-1的含量受到了泌尿系统良性疾病的影响。

BLCA-1基因序列类似于TI-227H［3］。TI-227H是由Ishiguro等［8-9］从小鼠黑色素瘤B16-F10亚系中分离出来的一种癌症转移相关基因，说明BLCA-1的表达可能与肿瘤的进展或转移有关，但本研究仅血清BLCA-1的含量支持此结果。膀胱癌是一种多基因参与、多分子协调、多阶段的复杂疾病，目前对于BLCA-1的研究尚处于初步阶段，BLCA-1用于临床的有效性仍需多中心临床研究佐证。

［1］许斌，华立新.膀胱癌流行病学进展［J］.国际泌尿系统杂志，2007，27（4）：469-476.

［2］Hosseini J， Golshan AR， Mazloomfard MM， et al. Detection of recurrent bladder cancer： NMP22 test or urine cytology？［J］. Urol J，2012，9（1）：367-372.

［3］Santoni M， Catanzariti F， Minardi D， et al. Pathogenic and Diagnostic Potential of BLCA-1 and BLCA-4 Nuclear Proteins in Urothelial Cell Carcinoma of Human Bladder［J］. Adv Urol， 2012，2012：397412.

［4］韩苏军，张思维，陈万青，等.中国膀胱癌发病现状及流行趋势分析［J］.癌症进展，2013，11（1）：89-95.

［5］Konety BR， Getzenberg RH. Nuclear structural proteins as biomarkers of cancer［J］. J Cell Biochem， 1999， Suppl 32-33：183-191.

［6］Getzenberg RH， Konety BR， Oeler TA， et al. Bladder cancer-associated nuclear matrix proteins［J］. Cancer Res， 1996， 56（7）：1690-1694.

［7］Myers-Irvin JM， Landsittel D， Getzenberg RH. Use of the novel marker BLCA-1 for the detection of bladder cancer［J］. J Urol，2005， 174（1）：64-68.

［8］Ishiguro T， Nakajima M， Naito M， et al. Identif ication of genes differentially expressed in B16 murine melanoma sublines with different metastatic potentials［J］. Cancer Res， 1996， 56（4）：875-879.

［9］Ishiguro T， Nagawa H， Naito M， et al. Analysis of novel metastasis-associated Gene TI-227［J］. Jpn J Cancer Res， 2000， 91（4）：390-394.

CHANGES AND SIGNIFICANCE OF BLCA-1 CONTENT IN PATIENTS WITH MUSCLE INVASIVE BLADDER CANCER

LI Hong-yang， WANG Zhi-yong， QIU Yu， et al
(Chengde Medical college, Hebei Chengde 067000, China)

Objective：To explore the changes and signifi cance of bladder cancer specifi c nuclear matrix proteins-1（BLCA-1） content in urine and serum of muscle invasive bladder cancer patients. Methods: Competitive ELISA assay was used to detect the BLCA-1 content in urine and serum of 22 muscle invasive bladder cancer patients， 21 healthy controls and 23 benign prostatic hyperplasia （BPH） patients. Results: The urine BLCA-1 content of muscle invasive bladder cancer patients was obviously higher than that of healthy controls and BPH patients （P＜0.05）； The serum BLCA-1 content of muscle invasive bladder cancer patients was obviously higher than that of healthy controls （P＜0.05）， but was no statistically signifi cant difference compared with BPH patients （P＞0.05）. In muscle invasive bladder cancer patients， the serum BLCA-1 content was concerned with age and pathological grading （P＜0.05）： The serum BLCA-1 content of patients higher than 60 years was obviously higher than that lower than 60 years； the serum BLCA-1 content of high grade patients was obviously higher than that of low grade patients. There was no signifi cant difference in sensitivity of urine and serum BLCA-1 （77.28% vs 56.37%） of patients with bladder cancer （P＞0.05）； The specifi city of urine BLCA-1 was obviously higher than serum BLCA-1 （93.18% vs 59.09%） of patients with bladder cancer （P＜0.05）. Conclusions: BLCA-1 may has certain diagnosticvalue for muscle invasive bladder cancer.

Muscle invasive bladder cancer；Bladder cancer specifi c nuclear matrix proteins-1； ELISA； Diagnosis

R737.14

A

1004-6879（2016）05-0372-03

（2015-12-07）