薛　健，王　欢，尹　锐

纤溶酶高产菌株的筛选与鉴定

薛健，王欢，尹锐

（吉林农业科技学院 生物工程分院，吉林 吉林 132101）

作为一种新型的溶血栓药物，大豆类发酵食品中所含有的纤溶酶具有安全性好、作用迅速，成本低，以及可通过液体发酵大规模生产等优点。采用酪蛋白平板法与纤维蛋白平板法相结合的方法，从市售纳豆产品中分离筛选出一株高产纤溶酶生产菌，发酵48 h后，测得其粗酶活为483.72 IU/mL，通过形态学，生理生化特征，16S rDNA序列鉴定及系统发育树的分析，鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。

纤溶酶；筛选；16S rDNA；鉴定

血栓性疾病严重威胁着人类的生命与健康，其发病率和死亡率高居各种疾病之首［1-2］。新型溶栓药物的开发迫在眉睫，从传统大豆类发酵食品中提取纤溶酶，是目前溶栓药物开发的新方向之一。纳豆激酶（narrokinase，NK）就是从日本传统食品纳豆中提取或纳豆菌发酵生产的一种新型纤溶酶，其分子质量远远小于尿激酶（urokinase，UK）、链激酶（streptokinase，SK）、纤溶酶原（tissue plasminogen aetivator，tPA），具有可由肠道吸收、作用迅速、持续时间长的特性，还能激活体内的tPA，使之温和、持续地提高血液的纤溶活性［3-5］。我国传统发酵食品豆豉中也被发现含有与纳豆激酶功能类似的纤溶酶［6-8］。这类来自大豆发酵食品中的纤溶酶具有诸多优点，并可由微生物液体发酵获得，酶活较高，成本低廉［9-11］，被认为是一种前景广阔的溶栓药物。

本研究利用收集的市售纳豆与豆豉样品，从中筛选出一株高产纤溶酶生产菌，并对其形态学特征、生理生化指标及分子生物学进行了鉴定，以期为心脑血管疾病相关保健产品与新型溶栓药物的开发与应用创造良好的条件。……