黄少文，羿利华，孙远明,2,3，雷红涛,2,3，柳春红,2,3*，沈玉栋,2,3*

1(华南农业大学 食品学院，广东　广州，510642)　2(广东省食品质量安全重点实验室，广东 广州，510642)　3(农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室，广东 广州，510642)



白酒中邻苯二甲酸二乙酯的化学发光酶联免疫分析方法

黄少文1，羿利华1，孙远明1,2,3，雷红涛1,2,3，柳春红1,2,3*，沈玉栋1,2,3*

1(华南农业大学 食品学院，广东广州，510642)2(广东省食品质量安全重点实验室，广东 广州，510642)3(农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室，广东 广州，510642)

以邻苯二甲酸二乙酯(diethylphthalate，DEP)为研究目标，以4-氨基邻苯二甲酸二乙酯为半抗原，通过重氮法偶联载体蛋白并免疫动物，制备针对DEP的特异性兔多克隆抗体。通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数，即包被抗原浓度为50ng/mL，4 ℃环境下包被12h；抗体用T液稀释；药物缓冲液选用pH5.4、0.005mol/L的PBS缓冲液；酶标二抗用P液稀释，稀释度为1/3000；反应时间是：一抗∶二抗=30min：40min。基于此建立了间接竞争化学发光酶联免疫法检测DEP。该方法对DEP的最低检测限(LOD)为3.09ng/mL，检测范围(IC20～IC80)为5.93～42.03ng/mL，半抑制浓度(IC50)值为16.57ng/mL，与14种结构类似物及功能类似物交叉反应均远低于0.5%，通过对白酒样品添加回收率的测定，证明了该方法的准确性，适用于白酒中DEP的快速检测。

邻苯二甲酸二乙酯；化学发光酶联免疫；间接竞争

邻苯二甲酸二乙酯(diethylphthalate，DEP)属于邻苯二甲酸酯类化合物中(phthalicacidesters，PAEs)的一种，主要用于塑料增塑剂、润滑剂、树脂溶剂、印刷油墨、胶黏剂、化妆品、农药载体等领域[1]，在生产和加工过程中，作为增塑剂的DEP并未与PVC塑料基质或其他产品牢固结合，随着这些产品的使用或废弃，DEP就会不断的释放进入环境，成为普遍的环境污染物[2]，并可通过食物链进入人体[3-4]。……