施武媚，张蓉蓉，吴剣兰（九江市第一人民医院，江西332000）

·临床研究·

淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白治疗复发性流产效果探讨*

施武媚，张蓉蓉，吴剣兰（九江市第一人民医院，江西332000）

目的探讨淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白治疗复发性流产的效果。方法按照随机双盲对照原则将2013年6月至2014年1月收治的60例复发性流产患者分为试验组和对照组，每组30例。对照组患者给予单纯淋巴细胞主动免疫治疗，试验组患者在此基础上给予丙种球蛋白治疗，比较两组患者治疗前后CD3+、CD4+、自然杀伤（NK）细胞、白介素10（IL-10）水平变化，以及随访20个月妊娠和流产情况。结果试验组患者治疗后CD3+、IL-10水平［（69.92±7.43）%、（1.74±0.33）pg/mL］明显高于对照组 ［（66.71±6.29）%、（1.35±0.31）pg/mL］，CD4+、NK细胞水平 ［（41.41±2.26）%、（10.38±5.62）%］明显低于对照组［（46.32±2.57）%、（17.46±6.65）%］，差异均有统计学意义（P＜0.05）；两组患者治疗后上述指标分别与同组治疗前比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。试验组患者妊娠成功率［90.00%（27/30）］明显高于对照组［66.67%（20/30）］，流产率［10.00%（3/30）］低于对照组［33.33%（10/30）］，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白能够有效改善患者的免疫功能指标，提高妊娠成功率，可作为复发性流产的优选治疗方案。

流产，习惯性；免疫，主动；淋巴细胞；丙种球蛋白类；抗体，封闭

复发性流产指产妇连续出现2次及以上自然流产的情况，临床发生率较高。临床研究表明，复发性流产受免疫、内分泌、感染、遗传等多种因素影响，多数患者并无明确原因，临床治疗较为棘手［1］。免疫治疗是目前治疗复发性流产的主要方法，其中最常用的是淋巴细胞主动免疫治疗及大剂量免疫球蛋白被动免疫治疗［2］。单一手段治疗已在临床上广泛开展，但疗效不一，淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白治疗报道较少。本研究拟深入分析淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白治疗的临床效果和优势，以期为复发性流产的临床治疗提供新的思路和依据，现将结果报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料选取2013年6月至2014年1月本院收治的60例复发性流产患者作为研究对象。纳入标准：符合《妇产科学（第8版）》［3］中复发性流产相关诊断标准；有连续2次及以上反复流产史，并结合病理诊断确诊；以往未进行过主动免疫治疗，内分泌及免疫功能正常，染色体正常；夫妻双方均能充分理解治疗并自愿接受。排除标准：合并器质性疾病，感染，家族病史，丈夫精液检查结果异常者。按照随机双盲对照原则，将60例患者分为试验组和对照组，每组30例。试验组患者年龄22～33岁，平均（29.27±3.26）岁；流产2～5次，平均（3.02±1.17）次；流产时孕周4～13周，平均（7.97±1.22）周。对照组患者年龄22～34岁，平均（29.35±3.22）岁；流产2～ 5次，平均（3.04±1.06）次；流产时孕周4～13周，平均（8.06±1.24）周。两组患者一般资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1治疗方法

1.2.1.1对照组患者给予单纯淋巴细胞主动免疫治疗。在无菌条件下抽取患者丈夫或无关第三方肘静脉血20 mL，利用淋巴细胞分离液（北京索奥生物医药科技有限公司，批号：20130529）分离获得外周血单核细胞，并制备成细胞浓度约为20×108L-1的细胞悬浊液，取0.8mL于患者前臂内侧行9点皮内注射，每3周1次，4次为1个疗程。疗程结束后2周复查封闭抗体，若仍为阴性则需再进行1个疗程的治疗；疗程结束后2周复查封闭抗体结果为阳性者可考虑怀孕，怀孕后需每2周给予1次淋巴细胞主动免疫治疗，连续治疗6次。

1.2.1.2试验组患者在对照组治疗基础上给予丙种球蛋白（南岳生物制药有限公司，批号：20130602）400mg/ （kg·d）治疗，静脉滴注，连续3 d。患者孕前每4周进行1次治疗，孕后改为每3周进行1次治疗，至孕26周。

1.2.2观察指标比较两组患者治疗前后CD3+、CD4+、自然杀伤（NK）细胞、白介素10（IL-10）水平变化，并进行连续20个月随访，记录随访期间患者妊娠和流产情况，以妊娠达到或超过28周判定为成功妊娠。

1.2.3CD3+、CD4+、NK细胞、IL-10检测抽取患者空腹静脉血4mL，使用乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝后高速分离血清，使用FAC-SCatibur型流式细胞仪（美国BD公司）进行检测。

1.3统计学处理应用SPSS19.0统计软件进行数据分析，计量资料以表示，采用t检验；计数资料以率或构成比表示，采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结　果

2.1两组治疗前后CD3+、CD4+、NK细胞、IL-10水平比较两组患者治疗后CD3+、IL-10水平明显升高，CD4+、NK细胞水平明显降低，与同组治疗前比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）；试验组患者治疗后CD3+、IL-10水平明显高于对照组，CD4+、NK细胞水平明显低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1　两组治疗前后CD3+、CD4+、NK细胞、IL-10水平比较

2.2两组妊娠和流产情况比较试验组患者妊娠成功率明显高于对照组，而流产率低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2　两组妊娠和流产情况比较［n（%）］

3　讨　论

复发性流产是妇产科发病率较高且较难处理的疾病，对患者的生殖健康有明显影响。妊娠是一种同种半异体移植情况，胎儿拥有父亲的抗原基因，因此能够产生抗原，若母体将这种抗原判定为异物而产生排斥作用将发生流产［4］。正常母体中能够产生封闭抗体，封闭异物抗原，从而保证妊娠的正常进行；而复发性流产正是因为母体缺乏封闭抗体而导致母体产生抗体排斥和攻击胚胎，造成自然流产［5］。许多专家也认为，复发性流产主要因胚胎未得到母体足够的封闭抗体和失去免疫防护而引发，即关键发病因素为胚胎抗原免疫低反应［6］。

近年来，免疫因素逐渐被临床医生所关注，有研究报道指出，免疫职能细胞亚群的格局变化，即辅助性T细胞Th1/Th2细胞因子失调、胎盘血管环境变化，可能是导致复发性流产的重要原因［7］。目前临床上应用的免疫治疗方案的主要作用机制为诱导母体对胚胎免疫产生耐受作用，从而保证胚胎在母体内能够正常存活。常用免疫治疗方案包括淋巴细胞主动免疫治疗、大剂量免疫球蛋白的被动免疫治疗和维生素D3治疗等。目前单用其中一种方法治疗复发性流产在国内一些大的生殖中心已开展，疗效不一。

本研究所采用的淋巴细胞主动免疫治疗主要是利用丈夫或无关第三方个体的外周血淋巴细胞诱导母体产生同种免疫反应，产生足够量的封闭抗体并对再次受孕的胚胎提供免疫保护［8］。而丙种球蛋白治疗则主要是通过补充丙种球蛋白中抵抗胚胎抗原的抗体成分改善母体封闭抗体缺乏情况，促进Th2等细胞因子产生，减少NK细胞毒性，从而起到保护胚胎的作用［9］。

本研究结果显示，试验组患者治疗后CD3+、IL-10水平均明显高于对照组，CD4+、NK细胞水平均明显低于对照组，表明淋巴细胞主动免疫与大剂量丙种球蛋白被动免疫有明显的协同作用，二者联合治疗方案在改善患者免疫系统功能方面临床效果更加明显。另外，本研究中试验组患者妊娠成功率明显高于对照组，也证实了淋巴细胞主动免疫与大剂量丙种球蛋白被动免疫联合治疗方案在保护胚胎、提高患者正常妊娠率方面有显著临床优势。

总之，淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白能够有效改善患者免疫功能指标，提高妊娠成功率，可作为复发性流产的优选治疗方案。

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10.3969/j.issn.1009-5519.2016.02.028

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1009-5519（2016）02-0240-02

江西省卫生和计划生育委员会科研基金资助项目（20157067）。

2015-10-22）