LC-MS/MS法测定小鼠脑组织中色氨酸及其3种代谢物
2016-09-12翟俊乐李孟秋刘新民潘瑞乐张泽生廖永红
田 欢,翟俊乐,李孟秋,刘新民,常 琪,潘瑞乐,张泽生,廖永红,*
(1.天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津 300457;2.中国医学科学院药用植物研究所,北京 100193)
LC-MS/MS法测定小鼠脑组织中色氨酸及其3种代谢物
田欢1,2,翟俊乐1,2,李孟秋1,2,刘新民2,常琪2,潘瑞乐2,张泽生1,*,廖永红2,*
(1.天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津 300457;2.中国医学科学院药用植物研究所,北京 100193)
目的:建立检测小鼠脑组织中色氨酸、5-羟基色氨酸、5-羟色胺和5-羟基吲哚乙酸含量的LC-MS/MS分析方法。方法:采用 TSK Gel amide 80(2.0 mm×15 cm,3 μm)色谱柱,柱温35 ℃,乙腈:甲酸铵水溶液(15 mmol·L-1,pH5.5)(40∶60,v/v)为流动相,流速0.4 mL·min-1,采用正离子多反应监测(MRM)模式进行扫描。结果:4种待测物均在5 min内完成测定,色氨酸、5-羟基色氨酸、5-羟色胺和5-羟基吲哚乙酸最低定量限分别为0.2、0.1、0.2、0.2 ng·mL-1,最低检测限分别为0.05、0.02、0.05、0.05 ng·mL-1,在1~500 ng·mL-1浓度范围内线性关系均良好,方法的精密度和加样回收率均符合生物样品的分析要求。将该方法应用于口服萱草花总黄酮的小鼠脑提取物检测后发现:脑内四种待测物浓度明显发生改变,且变化规律与阳性药物帕罗西汀相同。结论:本方法简便、准确、灵敏度高,专属性强,重复性好,适用于脑组织中色氨酸-五羟色胺代谢过程中的4种成分的测定,可应用于神经精神类药物的药理作用机制研究。
液相色谱-串联质谱联用,色氨酸,代谢产物,小鼠脑组织,萱草花总黄酮
抑郁症是严重威胁人类健康的常见疾病,在各类精神疾病中发病率最高[1]。抑郁症的发病机制目前不十分清楚,5-羟色胺(5-HT)缺乏是导致抑郁症发病的可能原因之一。……
