乔淦

（青岛科技大学化工学院，山东青岛　266042）



文蛤抗肿瘤蛋白M ere15的表达纯化及鉴定

乔淦

（青岛科技大学化工学院，山东青岛266042）

抗肿瘤蛋白Mere15是从海洋生物文蛤中获得的抗肿瘤多肽。前期研究表明，Mere15具有显著的体内外抗肿瘤活性，但其在文蛤体液中含量极低。利用简并引物技术克隆了Mere15的全基因序列，并在大肠杆菌中获得高效表达。利用亲和层析技术纯化目的蛋白，经透析除去盐和超滤浓缩，获得Mere融合蛋白，SDS-PAGE分析表明，目的蛋白分子量为33 kDa。MTT结果表明，目的蛋白对多种肿瘤细胞具有显著的抑制作用，为海洋抗肿瘤蛋白研究提供了新的思路，对抗肿瘤新药Mere15的开发应用也有一定的价值。

文蛤；抗肿瘤多肽；重组表达；细胞毒活性

文蛤（Meretrix meretrix） 作为一味传统中药，在《伤寒杂病论》及《百草纲目》等记载文蛤具有活血化瘀、防寒止痛的功效。目前，从文蛤分离的化合物有多糖、糖肽、脂质、牛磺酸、多肽等［1-7］；文蛤提取物具有抗氧化、抗癌、抗糖尿病、抗炎、增强免疫等生物活性［2，8-17］。文蛤多肽类的抗癌活性研究中，范成成等人［18］提取的一种文蛤多肽Mer2具有广谱的癌细胞抑制活性，调控癌细胞的凋亡、抑制癌细胞的生长。在本试验前期分离的1种文蛤多肽Mere15［19］，通过多通路诱导肺癌细胞A549凋亡文蛤多肽抑制肿瘤细胞微管蛋白聚合。Mere15可以抑制微管蛋白的聚合，调控细胞周期蛋白的表达，阻滞细胞周期的正常发生，在多肽作用下肺癌细胞在G2/M时期停滞，抑制肺癌细胞的生长并促进细胞凋亡。……