耿 瑛，李 荣*，姜子涛，张发博（天津商业大学生物技术与食品科学学院，天津市食品生物技术重点实验室，天津 300134）



钛胶RP-HPLC法同时测定5 种维生素

耿 瑛，李 荣*，姜子涛，张发博
（天津商业大学生物技术与食品科学学院，天津市食品生物技术重点实验室，天津 300134）

采用钛胶反相色谱柱，建立高效液相色谱法同时测定5 种维生素：烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素含量的检测方法。研究5 种维生素的保留行为与磷酸缓冲盐pH值、缓冲盐类型及浓度、柱温和流速的关系，得出了最优色谱条件：于波长210 nm处检测生物素和钴胺素，于波长270 nm处检测烟酸、烟酰胺和叶酸，磷酸盐pH 7.0，浓度5.0 mmol/L，柱温50 ℃，流速0.8 mL/min。分析5 种维生素保留的热力学参数焓、熵和吉布斯自由能。烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素标准曲线线性良好（R2＞0.999 0）；烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素的检出限分别为6、10、20、22、8 ng/mL；5 种物质的相对标准偏差均低于1.36%；加标回收率范围为92.30%～107.20%。方法的精密度和准确度均可满足高效液相色谱法的测定要求。

钛胶反相色谱柱；高效液相色谱法；维生素

随着高效液相色谱在分析领域的应用越来越广，色谱填料的发展也引起越来越多的关注。现在普遍使用的是硅胶色谱填料，但是它适用的pH值范围窄（pH值通常为3～10），并存在对碱性化合物不可逆吸附的缺点。而能克服其弱点的钛胶色谱填料，具有极其稳定的化学性质，在pH 1～14范围都能够稳定存在［1］，对碱性化合物具有很好的分离效果［2］，钛胶基质可以与含有羟基、磷酸、羧酸等基团的化合物进行结合［3］，且钛胶色谱柱具有热稳定性，升高温度使色谱柱具有较低的柱压，有利于分析物的分离分析，利用这一特性可测出分析物保留时的热力学常数ΔH°、ΔS°和ΔG°。……