刘 金，王丽威，2，岳喜庆，*（.沈阳农业大学食品学院，辽宁 沈阳 0866；2.辽宁工程技术大学理学院，辽宁 阜新 23000）



牛初乳中免疫球蛋白G双抗夹心ELISA检测方法的建立

刘 金1，王丽威1，2，岳喜庆1，*
（1.沈阳农业大学食品学院，辽宁 沈阳 110866；2.辽宁工程技术大学理学院，辽宁 阜新 123000）

将牛免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）作为免疫原免疫BALB/c小鼠，通过细胞融合、筛选获得分泌抗牛IgG单克隆抗体的细胞株。制备小鼠腹水抗体，进一步纯化获得抗牛IgG单克隆抗体。建立双抗夹心酶联免疫吸附法检测牛初乳中IgG质量浓度，该方法在7.8～1 000 ng/mL范围内有良好的线性关系，最低检出限为7.06 ng/mL，批内变异系数为4.52%，批间变异系数为4.94%，回收率为91.85%～102.45%。此法操作简便、准确度高、稳定性好，可用于实际牛初乳样品的快速检测。

牛初乳；免疫球蛋白G；单克隆抗体；双抗夹心酶联免疫吸附法

牛初乳一般是指奶牛分娩7 d内的乳汁。牛初乳不但含有常乳中的营养物质（蛋白质、脂肪、乳糖、脂肪酸、氨基酸和矿物质），还富含多种生理活性因子，包括免疫球蛋白、乳铁蛋白、生长因子、乳过氧化氢酶和溶菌酶等［1］。其中，免疫球蛋白是最重要的一类免疫因子，牛初乳中的免疫球蛋白主要是IgG、IgM和IgA，其中IgG的含量最高，约占80%～90%［2-3］。因此，IgG含量成为衡量牛初乳及其制品质量的重要指标。目前，牛初乳中IgG检测方法主要包括免疫扩散法［1，3-6］、免疫比浊法［1，6-8］、高效液相色谱法［1，9-10］、酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法［1，11-16］和表面等离子体共振法［16］等。这些方法中免疫扩散法应用最为广泛。但此法检测时间长、精确度不高。高效液相色谱法操作繁琐，不适合大批量检测。……