舒莉萍， 何志旭， 许　威， 丁可军

(1.贵州医科大学 组织工程和干细胞实验中心, 贵州 贵阳　550004； 2.贵州医科大学 实验动物中心, 贵州 贵阳　550004； 3.贵州医科大学 免疫学教研室, 贵州 贵阳　550004； 4.贵州医科大学 儿科学教研室, 贵州 贵阳　550004)



Irx5a在野生型斑马鱼早期发育中的表达*

舒莉萍1,2,3， 何志旭1,4**， 许威4， 丁可军4

(1.贵州医科大学 组织工程和干细胞实验中心, 贵州 贵阳550004； 2.贵州医科大学 实验动物中心, 贵州 贵阳550004； 3.贵州医科大学 免疫学教研室, 贵州 贵阳550004； 4.贵州医科大学 儿科学教研室, 贵州 贵阳550004)

[摘要]目的： 观测Irx5a基因在Tuebingen野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达。方法： 利用Trizol法提取斑马鱼胚胎的总RNA，应用RT-PCR方法扩增Irx5a 基因，将其克隆入pCS2+质粒中，经菌落PCR、双酶切法及DNA测序鉴定正确后，利用体外转录体系制备Irx5a的反义mRNA探针；用该反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交。结果： 构建和鉴定了Irx5a-pCS2+重组质粒，经斑马鱼全胚胎原位杂交检测Irx5a基因的表达，发现从3.7 hpf开始有表达，并且在胚胎神经系统和造血系统都有明显表达。结论： Irx5a基因可能参与了Tuebingen野生型斑马鱼胚胎发育早期的神经系统和造血系统的发育。

[关键词]Irx5a； pCS2+质粒； DNA,重组； RNA探针； 全胚胎原位杂交技术

Irx基因(Iroquoisgene)是Bosse等[1]于1996年在研究果蝇的外部感知器官形成过程中最早发现的一类重要的同源盒基因家族，主要有Irx1、Irx2、Irx3、Irx4、Irx5和Irx6共6个家族成员，其中Irx5在早期胚胎发育过程中起重要作用，主要与肺组织分化及视网膜视锥细胞形成有关[2-3]。Irx5对小鼠的心肌发育也有重要作用[4]，但其作用机制尚不明确。……