宋　锦, 姬牧远, 吴西军, 周艳华, 舒莉萍1，，4*** , 何志旭1，，3***

(1.贵州医科大学 免疫学教研室， 贵州 贵阳　550004； 2.贵州医科大学 干细胞与组织工程实验中心， 贵州 贵阳　550004； 3.贵州医科大学附院 儿科学教研室， 贵州 贵阳　550004； 4.贵州医科大学 实验动物中心， 贵州 贵阳　550004)



p21基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达*

宋锦1，2**, 姬牧远2,3, 吴西军2, 周艳华2, 舒莉萍1，2，4***, 何志旭1，2，3***

(1.贵州医科大学 免疫学教研室， 贵州 贵阳550004； 2.贵州医科大学 干细胞与组织工程实验中心， 贵州 贵阳550004； 3.贵州医科大学附院 儿科学教研室， 贵州 贵阳550004； 4.贵州医科大学 实验动物中心， 贵州 贵阳550004)

[摘要]目的： 探究p21基因在斑马鱼早期发育过程中的表达。方法: Trizol法提取野生型斑马鱼胚胎总RNA，RT-PCR法扩增p21基因片段，与pCS2+载体重组构建p21-pCS2+重组质粒，以T3 RNA 聚合酶制备地高辛标记的反义mRNA 探针，通过斑马鱼全胚胎原位杂交检测p21 基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达。结果： 成功构建了p21-pCS2+重组质粒，并制备反义mRNA 探针；原位杂交结果显示野生型斑马鱼0.5～18 hpf的胚胎均未发现p21 基因阳性杂交信号，24～36 hpf 胚胎可在脊索部位观察到阳性信号，48～72 hpf 胚胎可在头部胸腺附近观察到阳性信号，表达量均较低。结论： 成功制备了p21-pCS2+重组质粒及斑马鱼p21 基因反义mRNA 探针，p21 基因在野生型斑马鱼胚胎不同发育时相中表达水平不同。

[关键词]p21； 斑马鱼； 胚胎； 发育； 探针； 质粒

p21 基因表达产物是细胞周期的一种抑制因子，是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子CKI 中细胞因子诱导的蛋白/激酶相互作用蛋白Cip/Kip (cytokine-inducible protein/kinase inhibition protein,Cip/Kip) 家族的一员。……