孙　平，　肖　乐，　龚昆梅△,　王昆华

(1昆明理工大学医学院， 2云南省第一人民医院， 3昆明医科大学第一附属医院，云南 昆明 650034)



应用微阵列芯片分析糖尿病大鼠下肢动脉硬化miRNAs差异表达谱*

孙平1，肖乐2，龚昆梅2△,王昆华3

(1昆明理工大学医学院，2云南省第一人民医院，3昆明医科大学第一附属医院，云南 昆明 650034)

[摘要]目的： 通过建立糖尿病大鼠模型，检测糖尿病大鼠动脉硬化下肢与糖尿病大鼠无动脉硬化下肢的动脉组织中微小RNAs(miRNAs)的差异表达情况，探究异常表达的miRNAs参与糖尿病大鼠下肢动脉硬化可能的分子机制。方法: 选取建模成功的患有糖尿病下肢动脉硬化和患有糖尿病但无下肢动脉硬化的大鼠，取出下肢动脉组织，分别提取总的miRNAs，用miRNAs微阵列芯片进行杂交检测，经过芯片扫描和数据分析，再用RT-qPCR验证芯片的扫描分析结果，最终获得糖尿病大鼠下肢动脉硬化的miRNAs差异表达谱。结果: 筛选出10个与糖尿病大鼠下肢动脉硬化有关的miRNAs，即 rno-miR-206-3p、rno-miR-133a-5p、rno-miR-133b-3p、rno-miR-133a-3p、rno-miR-325-5p、rno-miR-675-3p、rno-miR-411-5p、rno-miR-329-3p、rno-miR-335和rno-miR-126a-3p，这10个异常表达的mi-RNAs都上调。RT-qPCR证实，其中9个miRNAs与芯片检查结果一致，仅仅rno-miR-335的PCR检测结果与基因芯片检测结果相反，表达下调。结论: 有一群miRNAs在糖尿病大鼠下肢动脉硬化中起着重要作用，其表达过程很可能影响着动脉硬化的进程。

[关键词]微小RNAs； 微阵列； 糖尿病； 下肢动脉硬化

微小RNAs(microRNAs，miRNAs)是一类21～25 个核苷酸组成的，不编码蛋白质的，多物种高度保守性、时序性和组织特异性表达的，通过抑制靶mRNA翻译或促其降解而参与控制基因表达的非编码小RNA，作为生物体正常生长发育的重要基因调控分子备受关注。……