Rab7蛋白参与了BLP耐受巨噬细胞对细菌清除能力增强的过程*
2016-06-06赵舒祺蔡军伟罗海华刘靖华
赵舒祺, 蔡军伟, 李 雪, 杨 勤, 黄 林,罗海华, 项 静, 乔 敏, 姜 勇, 刘靖华△
(1贵州医科大学病理生理学教研室,贵州 贵阳 550004; 2南方医科大学基础医学院病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广东 广州 510515)
Rab7蛋白参与了BLP耐受巨噬细胞对细菌清除能力增强的过程*
赵舒祺1,2,蔡军伟2,李雪2,杨勤1△,黄林2,罗海华2,项静2,乔敏2,姜勇2,刘靖华2△
(1贵州医科大学病理生理学教研室,贵州 贵阳 550004;2南方医科大学基础医学院病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广东 广州 510515)
[摘要]目的: 探讨Rab GTP酶是否参与了对细菌脂蛋白(BLP)耐受的骨髓诱导分化巨噬细胞(BMDMs)杀菌能力增强的过程。方法: 首先利用real-time PCR比较BLP耐受巨噬细胞和非耐受细胞中Rab5a、Rab5b、Rab7、Rab9、Rab9b、Rab11a、Rab11b、Rab12、Rab32和Rab34的表达变化,筛选出水平升高的Rab7分子;进一步用real-time PCR和Western blot实验证实Rab7的mRNA和蛋白表达是否在BLP耐受细胞感染大肠杆菌后继续升高;接下来用RNAi技术下调BLP耐受巨噬细胞Rab7表达,观察细胞对细菌的吞噬能力及杀灭能力的影响。结果: 在检测的10个Rab GTP酶中, Rab7在BLP耐受BMDMs的mRNA水平升高,是非耐受细胞的1.4倍;进一步用real-time PCR和Western blot实验证实Rab7的mRNA和蛋白表达在BLP耐受细胞感染大肠杆菌后,随着时间延长均明显升高;下调Rab7表达不影响BLP耐受巨噬细胞对细菌的吞噬能力,但是显著降低其对细菌的杀灭能力。结论: BLP耐受通过上调巨噬细胞Rab7的表达,在增强巨噬细胞对细菌的杀灭过程中发挥重要作用。
[关键词]细菌脂蛋白; 耐受; 细菌清除; Rab GTP酶; Rab7蛋白
细菌脂蛋白(bacterial lipoprotein,BLP)是革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌外膜中最丰富的蛋白,主要由生长或裂解的细菌释放。……
