王晓晗，　赵志国，　王智明，　王文茉，　张力平

中国医科大学附属盛京医院 口腔颌面外科病房，辽宁 沈阳　110004



·论著·

脱细胞真皮基质对骨质疏松大鼠骨缺损愈合影响

王晓晗，赵志国，王智明，王文茉，张力平

中国医科大学附属盛京医院 口腔颌面外科病房，辽宁 沈阳110004

摘要：目的观察脱细胞真皮基质(ADM)在骨质疏松大鼠颅顶骨缺损修复中引导骨组织(GBR)再生的特点和能力，探讨其生物相容性和对骨组织再生的作用。方法将26只SD雌性大鼠随机分假手术组(Sham组)、去卵巢手术组(OVX组)，每组13只。手术后常规饲养3个月，造模成功后，在大鼠的颅骨上，中线两侧制备2个约5 mm大小的洞型缺损，一侧由脱细胞真皮基质覆盖，另一侧为空白对照。Sham组中，空白对照一侧为A组，脱细胞真皮基质覆盖一侧为B组；OVX组中，空白对照一侧为C组，脱细胞真皮基质覆盖一侧为D组。术后6、12周，观察骨缺损愈合情况，骨组织HE、Masson三色染色，比较各组新骨长度、矿化率，免疫组化法检测不同时期骨痂骨钙素的表达。结果2只大鼠因腹腔内肠胀气死亡；其他动物于1周左右愈合，无感染及伤口裂开，可见缝合线未脱落。骨缺损建立后6周A、C组缺损未见明显缩小，缺损区由透明组织覆盖，缺损边缘明确，肉眼无明显区别；B、D组ADM膜已被纤维结缔组织包裹，缺损稍缩小，肉眼无明显区别。骨缺损建立后12周，A、C组肉眼无明显差别，缺损区由透明组织覆盖，缺损略有缩小；B组ADM膜变薄，触之较硬；D组ADM膜亦变薄，触之较软，缺损边缘较圆钝。组织形态学观察6周时A、C组新生骨痂较少，缺损断端被纤维组织包裹；B、D组ADM膜结构保留，成骨细胞和成纤维细胞长入ADM膜；C、D组骨缺损断端成骨密度较A、B组小。12周时A、C组新生骨痂较6周时稍多，但缺损仍未愈合；B组 ADM被成骨细胞改建为骨结构，覆盖于骨缺损上，但未与缺损断端相连，胶原支架结构部分降解；D组骨缺损未愈合，缺损断端骨生成量较6周时多，ADM膜结构仍在，未被成骨细胞改建。6、12周时，B、D组成骨情况均优于A、C组，差异有统计学意义(P<0.01)；6周时B组与D组成骨情况比较，差异无统计学意义(P>0.05)；12周时B组成骨情况优于D组，差异有统计学意义(P<0.05)。6、12周时,新骨成熟度A组与B组比较，差异有统计学意义(P<0.05)；C组与D组比较，差异无统计学意义(P>0.05)；B组和D组比较，差异有统计学意义(P<0.01)。B、D组6、12周新骨成熟度比较，差异有统计学意义(P<0.01)。结论ADM能引导骨组织再生，形成机械屏障纤维组织的长入，并提供三维支架结构，效果明显。骨质疏松时应用GBR技术结合其他骨组织工程技术或适当药物治疗可加速骨缺损的愈合，缩短愈合时间。

关键词：脱细胞真皮基质；骨质疏松；骨缺损；骨再生

DOI∶10.16048/j.issn.2095-5561.2016.02.02

绝经后骨质疏松症是原发性骨质疏松症的一种，是由于激素水平的下降骨微结构改变，骨量丢失，并且导致骨脆性增加而易发骨折的一种骨代谢疾病[1]。在生理情况下，骨代谢的平衡主要依靠破骨细胞的骨吸收和成骨细胞的骨形成来维持[2]。而骨质疏松时，由于破骨细胞活动的相对增强，平衡被打破，而出现了骨愈合迟缓。骨缺损的修复方法包括自体骨或异种骨移植和骨组织工程技术。由于自体骨移植时，会对自身供区造成更多伤害，并可能引发出血感染等并发症；异种骨移植还会引发免疫排斥等反应，目前应用较少[3]。Buser等[4]提出类似引导组织再生术(guied tissue regeneration，GTR)也可应用于引导骨组织(guide bone regeneration，GBR)的再生，是一种有效的方法能够促进骨缺损的愈合，保存或增加骨量。GBR膜是利用物理屏障作用，将骨缺损区与周围组织隔离，阻止成纤维细胞长入骨缺损，并能够诱导成骨细胞聚集分化，使成骨细胞有足够的空间迁移生长，达到促进骨缺损愈合的目的[5]。应用于GBR的屏障膜主要分为两种：可吸收膜和不可吸收膜。脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)是GBR膜的一种。

本研究应用去卵巢手术法模拟女性绝经后骨质疏松，对骨质疏松大鼠的骨缺损应用ADM膜修复，观察其成骨效果及诱导成骨的能力，探讨ADM在骨质疏松骨缺损治疗中的影响。

1材料与方法

1.1材料与试剂3个月雌性大鼠26只，体质量(200±10)g，SPF级。由中国医科大学实验动物中心提供，饲养于中国医科大学动物实验中心。大鼠均饲养于金属笼内，5只/笼，自由饮食饮水，环境温度为(24±2)℃，湿度40%～60%，12h交替光照，定期通风消毒。实验过程中对动物的处置参照国家科学技术部2006年发布的《关于善待实验动物的指导性意见》。海奥胶原膜(烟台正海生物技术有限公司)；Masson三色试剂盒(福州迈新生物技术开发有限公司)；骨钙素免疫组化试剂盒(艾博抗上海贸易有限公司)；二抗试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)图像采集软件：NIS-Elements F 3.0；图像分析软件：NIS-Elements Br 3.0。

1.2研究方法

1.2.1实验动物分组将26只大鼠随机分假手术组(Sham组)、去卵巢手术组(OVX组)。造模成功后，在大鼠的颅骨上，中线两侧制备2个约5 mm大小的洞型缺损，一侧由ADM膜覆盖，另一侧为空白对照。Sham组中，空白对照一侧为A组，脱细胞真皮基质覆盖一侧为B组；OVX组中，空白对照一侧为C组，脱细胞真皮基质覆盖一侧为D组。

1.2.2模型建立根据大鼠体质量腹腔注射10%的水合氯醛溶液(0.3 ml/100 g)麻醉约5 min，俯卧位固定于实验台上。打开腹腔，切口约1 cm，小号止血钳在子宫末端与卵巢之间的最细处夹闭，0号手术线结扎后用眼科剪将卵巢全部切除，松开止血钳，将子宫轻轻放回入腹，分层缝合切口，同样方法切除对侧卵巢。见图1。术后给予肌肉注青霉素3 d，复苏后饲养于原环境。常规饲养3个月，OVX组即达到骨质疏松标准[6]。Sham组方法同OVX组，但不切除卵巢，只切除等体积大小的脂肪组织。

图1　切除的大鼠卵巢

1.2.3骨缺损的建立根据大鼠体质量腹腔注射10%的水合氯醛溶液(0.3 ml/100 g)麻醉。将大鼠俯卧位固定于实验台上，在颅骨正中取一长约2 cm切口，分离筋膜，暴露骨皮质。在正中线的两侧，用骨钻在生理盐水冷却下分别制成两个直径约5 mm的洞型骨缺损。左侧骨缺损完全覆盖ADM膜，且超过缺损2～3 mm，右侧为空白对照。见图2。术后肌肉注射庆大霉素3 d，8万U/d，分笼饲养，观察动物活动及进食情况。

图2　骨缺损模型的建立

1.2.4HE染色骨缺损的建立后6、12周每组分别随机处死3只大鼠，分离出颅顶骨，置于4%多聚甲醛溶液，4℃固定12～48 h。按中线分离颅顶骨左右两侧，经EDTA脱钙后，制备5 μm石蜡切片，行HE染色。HE染色镜下观察新生骨质的长度，按照编号顺序每隔10张切片选取一张进行计算，每个标本共选取6张切片，测量新生骨质的长度。采用Image-Pro Plus 6.0软件对新骨长度进行计量分析。

成骨长度比=新生骨长度/骨缺损长度×100%

1.2.5Masson染色Masson三色染色与HE染色切片脱蜡处理至脱水方法相同，Masson复合染色剂染色，95%乙醇、100%乙醇脱水，透明，固封。Masson三色染色能够反映骨质成熟程度，新生骨呈蓝色，成熟为红色。逐渐成熟的骨质为红蓝相间，即骨质越成熟，红染区域越大。每个样本随机选取切片3张，每张切片随机选取3个(×200)视野，采用Imagepro plus 4.5软件对新骨进行半定量分析。

1.2.6免疫组化染色5μm石蜡切片，脱蜡至水同HE染色,3% H2O2去离子水室温孵育10 min以阻断内源性过氧化物酶活性，滴加血清封闭，室温孵育30 min，倾去，滴加一抗，4℃过夜；滴加酶标抗兔聚合物，室温20 min；滴加聚合物增强剂，室温15 min；DAB显色剂显色1 min，自来水充分冲洗。各步骤之间用PBS缓冲液5 min×3次冲洗。苏木素复染2 min，流水冲洗40 min。脱水，透明，封片。

2结果

2.1各组大鼠骨缺损愈合情况所有实验动物局部均未发现炎症反应，软组织愈合未见异常，缝合线未见脱落。术后6周：各组大鼠颅顶骨缺损均未愈合，A、C组缺损未见明显缩小，缺损上方有透明软组织覆盖；B、D组缺损稍缩小，边缘有菲薄骨质形成，ADM膜仍在，较刚植入时薄，质软。术后12周：A、C组缺损未愈合，缺损稍缩小，缺损边缘变圆钝，上方由透明组织覆盖。B组可见骨样组织于缺损内，触之稍硬，ADM膜更薄；D组缺损未愈合，但缺损明显缩小，上方覆盖的ADM膜较第6周更薄，接近透明。

2.2HE染色第6周A组可见缺损区被纤维组织占据，缺损边缘可见少量与成熟骨质不同的类骨质形成，内外骨膜无增厚，新骨中可见散状骨细胞，成骨不活跃，只有少量成骨细胞围绕骨膜与断端周围，但骨密度较高，无明显的骨髓腔结构。缺损中心未见大量疏松的纤维结缔组织和小血管生成。C组与A组类似，但新骨密度较A组小，中央可见散在的小血管。见图3。B组可见骨缺损断端有骨基质生成，骨细胞位于骨基质内，大量成骨细胞包绕新生骨质，ADM为胶原网状结构，有成骨细胞和成纤维细胞长入，ADM膜内可见大量血细胞，未见板层骨形成。D组可见骨缺损断端有骨基质生成，可见到骨内膜增厚，骨细胞排列在新骨周围，ADM膜结贴新生骨面，有大量细胞长入，其中可见散在的血管，ADM膜已被血管化。见图4。第12周A组骨断端仍被纤维组织包绕，只有少量成骨细胞排列在新骨表面，成骨长度与6周时差异不明显，骨密度较高。C组可见骨内外膜均增厚，但成骨长度并不明显，只有少量成骨细胞排列在新骨表面，断端被纤维组织包裹。见图5。B组可见缺损被新骨覆盖，新生骨与骨缺损断端未融合，成骨细胞围绕新骨排列，新骨内可见降解的ADM膜胶原成分，部分新骨已开始矿化，新骨内可见小血管；ADM膜开始降解，但仍可见胶原排列。D组可见缺损未完全被新骨充填，断端可见新骨形成，部分新骨开始矿化，缺损中间可见大量成骨细胞和破骨细胞以及小骨岛，ADM膜降解变薄，但仍可见到胶原纤维，ADM未被成骨细胞改建为骨结构，降解较B组多，胶原纤维变纤细。6、12周时，B、D组成骨情况均优于A、C组，差异有统计学意义(P<0.01)，说明ADM膜能起到明显的引导骨再生的作用；6周时B组与D组成骨情况比较(P>0.05)，差异无统计学意义；12周时B组成骨情况优于D组，差异有统计学意义(P<0.05)。见图6，表1。

图3　镜下观察大鼠颅顶骨HE染色结果

2.3Masson染色原骨组织，新生骨组织和纤维结缔组织的颜色，形态均清晰可辨。新骨为蓝色，范围与HE染色新骨形成的区域相一致，且随时间增加骨基质开始矿化，红染区域开始增多。6、12周时A组与B组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，说明应用ADM膜能够加速新骨矿化。6、12周时，C组与D组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，说明ADM膜对于加速骨质疏松的新骨矿化作用并不明显。6、12周时，B组与D组比较，差异有统计学意义(P<0.01)，说明骨质疏松能够阻碍新骨的矿化，延缓骨愈合。B、D组6、12周骨愈合情况比较，差异有统计学意义(P<0.01)，说明随着时间的增长，新骨逐渐开始矿化，趋于成熟。见图7、表2。

图4　镜下观察大鼠颅顶骨HE染色结果

图5　镜下观察大鼠颅顶骨HE染色结果

图6　镜下观察大鼠颅顶骨HE染色结果

组别6周12周A组12.93±1.7817.78±3.77B组39.70±4.8386.51±6.58C组14.45±1.7514.74±1.44D组47.62±5.8361.83±6.89

图7镜下观察大鼠颅顶骨Masson染色结果(a.A组6周；b.B组6周；c.C组6周；d.D组6周；e.A组12周；f.B组12周；g.C组12周；h.D组12周)

表2　各组大鼠骨缺损建立6、12周新骨成熟度

2.4免疫组化染色A、B组中骨缺损断端成骨细胞最多，成骨最活跃，分泌骨钙素最多；C、D组破骨细胞数量较多，骨钙素分泌较A、B组较少，这与其他结果相一致。图8镜下观察大鼠颅顶骨免疫组化染色结果(a.A组6周；b.C组6周；c.B组6周；d.D组6周；e.A组12周；f.C组12周；g.B组12周；h.D组12周；)

3讨论

GBR屏障膜中不可吸收膜分为聚四氟乙烯膜和钛膜，骨缺损再生的效果较理想，但不能降解，需要二次手术取出。可吸收膜分为带蒂筋膜、可吸收胶原膜、异种可吸收膜及合成膜。在兔的极限骨缺损的修复中应用带蒂筋膜，其稳定性提高后，能够很好的维持膜下空间和植骨区，有利于超临界骨缺损的修复[7]，但来源较少，临床应用较少。可吸收胶原膜生物相容性好，伤口显露率较不可吸收膜低，成功率高，其缺点是机械强度低，有时会向骨缺损方向塌陷，影响骨再生效果。异种可吸收膜临床上常应用于烧伤，乳房重建，修复和再生牙周组织等，很少涉及引导骨组织再生。合成膜包括壳聚糖膜，是目前发现唯一带正电荷的天然碱多糖，生物相容性好，广泛存在于甲壳动物的甲壳中[8]。临床上应用于透析膜，促进伤口愈合，血液抗凝剂等。壳聚糖还能抑制牙龈卟啉单胞菌的活性，效果随浓度的增加而增加[9]。有研究将氧化锌与电纺丝膜结合，观察其对细胞生物活性的影响，发现其可以促进牙周细胞的增殖、分化以及牙周组织再生[10]。

由于牙周炎，根尖病变，肿瘤手术等原因造成的颌骨缺损一直是口腔科的常见疾病，发生于中老年人群的颌骨缺损再又常伴随着骨质疏松，这种情况延缓了骨缺损愈合的时间和效果。去势造模法是通过动物的双侧卵巢造成雌激素缺乏，模拟临床上绝经期后妇女的骨质疏松，两者的共同点都与雌激素水平的下降有直接关系。雌激素可以通过调节受体机制来抑制破骨细胞的活性，诱导破骨细胞凋亡，因此雌激素的降低导致破骨细胞数目增多，功能活性加强，骨缺损愈合速度减慢。去势法处理因素单一，成模效果确定，可较快的复制出骨质疏松模型。

颅骨缺损模型与颌面部相似：(1)从组织胚胎学角度来看，颅骨都以膜内成骨的方式成骨，膜内成骨是由间叶组织和骨母细胞等分化而成的成骨细胞形成编织骨的成骨过程。成骨初期，内外骨膜不断增生，钙化成骨分别形成内骨痂和外骨痂，随时间延长骨痂矿化，逐渐成熟。(2)从解剖学上来说，颅骨与颌面部骨骼都是由内外两层骨皮质包绕内部的骨松质组成。因此，可以由颅骨代替颌骨进行研究[11]。去势后大鼠颅骨的骨密度和骨量也有明显的下降，可应用去势后大鼠颅骨进行骨质疏松骨相关的研究。以往研究中发现，骨缺损的大小也影响骨缺损的愈合，因此临界骨缺损，即在大鼠生命周期不给予治疗且不能痊愈的最小骨缺损直径，有研究发现，全厚5 mm颅盖骨缺损为大鼠的骨缺损临界标准。近年来，有学者应用大鼠颅骨直径4 mm全厚骨缺损作为生物材料对骨缺损愈合影响进行研究，也达到了预期效果[12]。本研究取5 mm全厚骨缺损，12周时，发现A、C组均未愈合且成骨量远低于B、D组；B组新骨覆盖骨缺损之上，但未完全改建和矿化成熟；D组缺损未完全愈合。这说明5 mm全厚骨缺损可以达到实验比较的目的。

成骨细胞的成骨过程主要分为4个阶段：成骨细胞的增殖，骨基质的成熟，骨基质的矿化，成骨细胞凋亡。成骨细胞是骨形成及骨重建及修复中的主要功能细胞，负责骨基质的合成分泌和矿化。绝经后骨质疏松时，成骨细胞加速增殖，但同时成骨细胞的增殖周期也相对延长，成骨细胞数量相对减少，骨形成慢于骨吸收，因此绝经后骨质疏松也成为高转换型骨质疏松[13]。雌激素缺乏时破骨细胞内的硫醇氧化剂的浓度降低，增强破骨细胞对破骨细胞基因信号的敏感性，从而使活性氧介导的细胞因子过度分泌，增加了破骨细胞的活性，骨吸收水平快于骨形成，骨转换能力增强，骨缺损的愈合时间延长，新生骨痂减少且强度较差[14]。Arslan等[15]研究表明，骨质疏松可抑制膜内成骨去骨基质的矿化，并阻碍骨痂的成熟。本研究发现，在成骨6周时，B、D组成骨长度，差异无统计学意义(P>0.05)，可能在成骨早期，虽然骨质疏松对成骨速度造成一定影响，在破骨细胞活性增强的同时，成骨细胞成骨能力也加强，且ADM膜起到屏障的作用，阻止纤维组织长入骨缺损断端。但B组新骨成熟度明显高于D组，说明成骨早期ADM膜虽能促进成骨长度，但并不能影响新骨的成熟度，新骨的矿化程度仍然低于正常情况，导致了骨缺损愈合延缓。

GBR技术中对引导膜的要求主要包括：(1)良好的生物相容性，无排斥反应；(2)可在体内降解，且降解速度与组织愈合时间平衡，降解产物无不良反应或有利于伤口愈合；(3)良好的选择性细胞屏障功能；(4)具有良好的物理性，便于操作，且有一定的机械强度，能形成三维结构和支持再生空间[16]。本研究中应用的ADM膜来源为牛皮，经处理脱去了真皮和表皮中的细胞成分，保留了真皮中不溶性基质而成的材料，具有低免疫原性。ADM为三维网状支架结构，主要成分为Ⅰ型胶原，Ⅲ型胶原只有原来真皮层的一半，Ⅳ型和Ⅶ性胶原几乎消失[17]。胶原成分可以促进止血，刺激血小板附集，支架结构可以使成骨细胞附着在表面，并促进新血管的形成，增加成纤维细胞的趋化性。Ⅰ型胶原能够能够促进骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞，并且促进成骨细胞的成骨活动，增加成骨细胞分泌骨基质的能力[18]。本研究中6、12周时，ADM膜均体现出了良好的屏障作用，阻止了纤维结缔组织长入骨缺损，并给新骨的形成提供了一定的生长空间，6周时开始有成骨细胞和成纤维细胞长入ADM膜，并开始血管化，12周时ADM膜依然没有完全降解，但B组ADM膜起到了良好的三维支架结构，供成骨细胞长入、定植、增殖、成骨，新骨覆盖了几乎全部骨缺损，加速了成骨过程；D组 ADM膜组成骨细胞没有利用到其三维支架结构成骨，只是在缺损端逐渐向中心成骨，可能在骨质疏松的骨愈合过程中，成骨细胞的形态发生了成纤维细胞变，并开始形成表达非特异性的Ⅲ型胶原，呈现出了成纤维细胞的表型[19]。一方面成骨细胞活性下降，分泌骨基质功能下降；另一方面ADM膜降解加速，不能够起到三维支架的结构，而骨缺损未达到愈合。

骨钙素是由成熟的成骨细胞合成和分泌的一种特异的非胶原骨基质蛋白，是骨形成和骨转换的标志性物质，成熟的骨钙素分泌出成骨细胞后，大部分沉积在骨基质当中，占骨基质非胶原蛋白质成分的25%，小部分进入血循环，血清骨钙素能够反映骨密度的情况[20]。有研究表明，骨钙素是骨形成的决定性因素[21]。骨质疏松时，成骨细胞合成骨钙素的能力下降，且骨转换加强，能与羟基磷灰石结合的骨钙素减少，骨痂矿化速率减慢。在本研究中，免疫组化可以观察到，C、D组成骨细胞明显较A、B组少，且新骨与骨钙素结合较少，影响骨痂的成熟。本研究只设计6周和12周两个观察点，并不能明确观察到骨愈合和矿化的晚期过程及愈合的确切时间，结果具有局限性。应至少设计到24周，并增加新骨的应力测试等测量骨痂的硬度，更全面的了解ADM膜对骨质疏松骨缺损的影响，以指导临床的应用。

ADM膜具有明确的引导骨再生的作用，但骨质疏松时，虽成骨较不覆盖膜时增快，但新骨长度和成熟度均未达到正常水平。在临床应用中，需联合应用骨组织工程其他方法或药物治疗方法对骨缺损进行修复，使骨质疏松骨缺损在较短时间内愈合。

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Effect of acellular dermal matrix on osteoporosis rats bone defect healing

WANG Xiao-han,ZHAO Zhi-guo,WANG Zhi-ming,WANG Wen-mo,ZHANG Li-ping

(Department of Oral and Maxillofacial Surgery,Shengjing Hospital of China Medical University,Shenyang 110004,China)

Abstract：ObjectiveTo observe the characteristics and capabilities of acellular dermal matrix(ADM)in osteoporosis rats cranial parietal bone defect repair guided bone regeneration(GBR),to explore the biocompatibility and effects on bone regeneration.MethodsA total of 26 SD female rats were randomly divided into the control group(Sham group:n=13)and the ovariectomized group(VOX group:n=13).Conventional breeding for 3 months after the surgery,after the success of the building,in skull of rats,there were 2 defective holes with 5 mm preparation on both sides of central line,one side was covered with ADM,the other side was control blank(CK).In Sham group,the CK side was Group A,the ADM cover side was Group B.In the CK side in OVX group was Group C,the ADM cover side was Group D.In 6 and 12 weeks postoperatively,the clinical features such as the bone defect healing,bone tissue HE and masson trichromatic dyeing,new bone lengths were compared,the mineralization rate,immunohistochemical method was to detect callus osteocalcin expression in different periods.ResultsAmong the gross observation experimental animals,there were 2 deaths caused by bowel bilges gas in.Other animals healed within a week without infection and wound dehiscence,visible sutures were not fallen off.6 weeks after surgery,the blank defects naked eye obvious difference between the two groups,the defect area was covered with transparency,defect edge was clear.ADM cover side was with visible white ADM,defect edge was clear.After 12 weeks,there was no naked eye obvious difference between two groups of blank defect,the defect area was covered with transparency,defect edge was clear.ADM cover side with visible white ADM film was thinner,harder to hit,defect edge was obtuse.The tissue morphology observation 6 weeks when two groups of new bone gap defect was not obvious,the broken end by fibrous tissue package.Sham group of bone defect end osteogenesis was dense,ADM retained membrane structure,osteoblast and fibroblast caused ADM membrane,ADM were rebuilt gradually.VOX group of bone defect end osteogenesis density was small,in the Sham group still in ADM membrane structure,osteoblast and fibroblast caused ADM membrane,ADM membrane was rebuilt.At the 12th week,two groups of blank new bone defect was a little more than 6 weeks,but still not healed.Sham group of ADM was converted into bone structure,osteoblast bracket structure degradation,covered on the bone defect,not connected to the end.VOX group of bone defect healing,bone defect broken end generation was more than four weeks,ADM was still in the structure,degradation became thinner,not converted into bone osteoblasts structure.Conclusionby experiment,ADM can be guided bone tissue regeneration,to be implanted in rats after skull surface,without rejection,can form the organization of fibrous tissue ingrowth,mechanical barrier and provide three framework for osteoblasts osteogenesis,absorption rate is moderate,12 weeks when not fully biodegradable.Normal condition ADM membrane can be osteoblast reconstruction,can be closed early bone defect,and osteoporosis due to osteoblast activity decline,ADM film has not been converted bone,mechanical barrier effect,only far slower and normal.Therefore,osteoporosis GBR technique should be combined with tissue engineering technology or other drug therapy to accelerate the healing of bone defect to shorten the healing time.

Key words:Acelullar dermal matrix;Osteoporosis;Bone defect;Bone regeneration

收稿日期：2016-03-24

文章编号：2095-5561(2016)02-0069-07

中图分类号：R681

文献标志码：A

通信作者：张力平，E-mail：228830225@qq.com

基金项目：辽宁省科技攻关课题(2011225020)

第一作者：王晓晗(1990-)，女，辽宁辽阳人，医师，硕士