孙玮遥，王向东，林　剑*

（1.烟台大学 生命科学学院，山东 烟台 264005；2.山东大学 医学院，山东 济南 250100）

外源蛋白在毕赤酵母中的高效表达策略

孙玮遥1，王向东2，林剑1*

（1.烟台大学 生命科学学院，山东 烟台 264005；2.山东大学 医学院，山东 济南 250100）

毕赤酵母（Pichia pastoris）表达系统是目前应用最为广泛的蛋白表达系统之一，已成功表达了数百种外源蛋白。但不同外源蛋白的表达量差异较大，能够实现工业化生产的蛋白表达体系并不多，如何提高目的蛋白在该系统中的表达量有着重要的理论和现实意义。该文从发酵工艺方面对影响外源蛋白表达的各种因素做了具体阐述，主要包括培养基的选择与优化、发酵过程参数的控制、分泌型蛋白酶的降解抑制以及诱导型毕赤酵母的甲醇流加机制，旨在提高外源蛋白表达量。

毕赤酵母表达系统；外源蛋白；发酵工艺；优化

以脱氧核糖核酸（deoxyribose nucleic acid，DNA）重组技术为代表的基因工程的飞速发展，为分子生物学领域的各项研究提供了契机。蛋白质作为基因表达的产物，成为了一直以来的研究热点，从而也带动了蛋白质表达系统的快速发展。毕赤酵母（Pichia pastoris）表达系统作为目前应用最为广泛的蛋白表达系统之一，已成功表达了包括激素、疫苗、细菌毒素以及各类药用制品在内的数百种外源蛋白。

虽然已有数百种外源蛋白在毕赤酵母中表达成功，但不同外源蛋白的表达量却差异巨大。HASSLACHER M等［1］报道过的用毕赤酵母发酵生产胞内羟基腈裂解酶，表达量可达22 g/L，而WEISS S等［2］用毕赤酵母表达仓鼠阮病毒蛋白质PrPc的表达量却不足0.1 mg/L。……