肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导剂对人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1表达的影响
2016-01-20李嘉薇王荔
李嘉薇,王荔
动脉粥样硬化型是缺血性卒中的一个重要类型。动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的病因不清楚,可能与血管的慢性进行性炎症病变有关,并以内皮功能失调、血管壁胆固醇脂质沉积及钙化和细胞凋亡为特征,最终导致动脉粥样斑块形成、血管腔狭窄。其中血管内皮细胞功能紊乱是AS早期改变和关键始动因素[1]。
肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导剂(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)是近年发现的一种新的炎性细胞因子[2]。在AS的研究中发现其与动脉内皮功能失调、平滑肌细胞增殖迁移、粥样斑块慢性炎症反应及斑块的不稳定性有关[2]。血凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)是氧化修饰低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)在内皮细胞的特异性受体,对AS的进展起促进作用[3]。本研究旨在探讨TWEAK对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)上LOX-1表达的影响,以及阿托伐他汀对内皮细胞的抗炎作用,为进一步研究TWEAK在AS中的作用奠定基础。
1 材料与方法
1.1 细胞培养及处理 人脐静脉内皮细胞株(购于无锡菩禾生物医药技术有限公司)培养于含10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)(购自杭州四季青生物材料有限公司)、10 000 μ/ml青霉素、10 000 μg/ml链霉素的1640培养液(购自武汉博士德生物工程有限公司)中,放置于含5%CO2、37℃培养箱中培养,每2~3天用0.25%胰蛋白酶(含0.02%EDTA)消化细胞并传代。待细胞融合时制成单细胞悬液,稀释到1×106/mm3细胞数接种于6孔培养板中,次日待细胞贴壁后再用无血清1640培养液培养24 h使细胞进入休眠期,然后进行干预。
1.2 主要试剂的配制 TWEAK工作液的配制:将TWEAK(购自PeproTech公司)25 μg溶于250 μl的磷酸盐缓存液(pH 7.5)中,即配制成0.1 mg/L浓度的工作液;……
