高效液相色谱法测定玉米蛋白粉中游离氨基酸含量
2016-01-03刘跃芹吴延东赵雪松刘艳波
中国粮油学报 2016年7期
刘跃芹 吴延东 赵雪松 刘艳波 吴 杰 闫 寒
高效液相色谱法测定玉米蛋白粉中游离氨基酸含量
刘跃芹 吴延东 赵雪松 刘艳波 吴 杰 闫 寒
(玉米深加工国家工程研究中心,长春 130033)
建立高效液相色谱法同时测定玉米蛋白粉中17种游离氨基酸含量的方法。样品用盐酸溶液(0.1 mol/L)提取,采用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)为衍生剂衍生。应用Nova-PakTM C18柱,以10 mmol/L醋酸铵缓冲液、乙腈和超纯水为流动相进行梯度洗脱,柱温为37℃,检测波长为248 nm,外标法定量。结果表明,17种游离氨基酸线性关系良好,其中16种游离氨基酸在0.002 5~0.5 μmol/mL范围内具有良好的线性关系,胱氨酸浓度在0.006 3~1.25μmol/mL范围内线性关系良好,相关系数在0.999 1~0.999 9之间,回收率为95.10% ~105.21%,RSD为1.36% ~4.39%。该方法灵敏度高、重现性好、操作简单,可用于检测玉米蛋白粉中游离氨基酸含量。
高效液相色谱法 游离氨基酸 玉米蛋白粉
玉米蛋白粉已被广泛应用于鸡、猪和牛的养殖生产,饲用价值高,安全性能好,潜在开发性大[1-4]。氨基酸是合成蛋白质,维持氮平衡,构成体内各种酶、抗体及某些激素的原料,并且能调节生理机能,促进生长发育,补充能量代谢消耗。对玉米蛋白粉中游离氨基酸的含量进行监控,有利于玉米蛋白粉的更广泛应用。
氨基酸测定最常用的分析方法有:氨基酸专用分析仪分析,高效液相色谱仪分析,高效液相色谱-质谱联用技术分析等[5]。但是氨基酸专用分析仪的价格昂贵,专属性强,仪器利用率低;高效液相色谱-质谱联用技术前处理繁琐;……
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