竹鼠肠道中厌氧纤维素降解菌的分离与鉴定
2015-12-21曹晓燕汪珊如徐高跷张胜男王士长梁世忠
曹晓燕 汪珊如 徐 雯 徐高跷 张胜男 王士长 梁世忠*
(1.广西大学动物科学技术学院,南宁 530005;2.南宁学院,南宁 530200)
近年来,一些学者对厌氧和兼性厌氧的纤维素降解菌进行了研究[1-3],以扩大纤维素酶的应用。但对于肠道中厌氧型降解菌的研究鲜有报道,而动物肠道中99%的菌群是厌氧或者是兼性厌氧菌[4]。竹鼠,分类地位是哺乳纲啮齿目竹鼠科竹鼠属和小竹鼠属,主要分布在我国的南部和中部地区、缅甸北部和越南等国家和地区。竹鼠属于草食性动物,日常主要以植物的根茎类为食。平时饲养时主要以农作物的新鲜秸秆为饲料,其采食的部分是其他动物弃食的部分,是消化利用粗纤维的佼佼者。中华竹鼠主要以成熟竹子为食物来源,对于纤维素具有很强的消化能力。本试验的目的是从竹鼠肠道中分离、鉴定出高活力厌氧纤维素降解菌,以期为提高动物肠道纤维素的利用率,增加动物抵抗力,减少抗生素的使用和解决厌氧环境下高效分解纤维素利用率提供理论支持,为绿色粗词料微生物添加剂的研究和开发提供基础资料。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 培养基
1.1.1.1 初筛培养基[5-6]
矿物质溶液:(NH4)2SO46.0 g,NaCl 6.0 g,MgSO40.6 g,CaCl20.6 g,加蒸馏水至 1 000 mL。
培养基:NH4Cl 2.0 g,K2HPO41.8 g,酵母膏1.2 g,矿物质盐溶液 150 mL,DL-半胱氨酸盐酸盐0.5 g,纤维素[微晶纤维素(MCC)或羧甲基纤维素钠(CMC-Na)]悬浊液100 mL(5%,m/V),pH调至7.0,加蒸馏水至1 000 mL。灭菌后,按照每200 mL培养基加入1 mL刚果红(CR)溶液(10 mg/mL)的比例加入CR溶液,混匀后倒入平板。
1.1.1.2 复筛培养基[5]
复筛培养基组成中纤维素悬浊液采用纤维二糖代替作为唯一的碳源,溶液纤维二糖含量5%(m/V),其他成分同初筛培养基。……
