山羊瘤胃中单宁降解菌的分离、筛选和鉴定
2015-12-21李兴芳张胜男徐高跷汪珊如王士长梁世忠
李兴芳 徐 雯 张胜男 徐高跷 汪珊如 王士长 梁世忠*
(1.广西大学动物科学技术学院,南宁 530005;2.南宁学院,南宁 530200)
单宁是是一种抗营养因子,味涩,并且具有抑菌作用,影响动物对营养物质的利用[1-3]。降解单宁的微生物能够分泌一种酶,此酶可以对单宁产生抗性并使单宁发生降解[4-7]。
一些家畜和野生动物(如绵羊、山羊、鹿和麋鹿)的消化道中有单宁降解菌,有助于这些动物利用高单宁饲料。Skene等[8]于1995年首次从饲喂富含单宁牧草的山羊瘤胃中分离出了的厌氧菌反刍月形单胞菌(Selenomonas ruminantium),该菌不仅能够降解单宁,还可以利用其降解产物;Odenyo等[9]在一些非洲反刍动物的瘤胃液中也发现耐受单宁或降解单宁的微生物;Goel等[10]从没有采食含单宁饲粮的山羊粪便中分离到6株可以分解单宁-蛋白质结合物的革兰氏阳性球菌(gram-positive cocci),并通过分析证明它们属于不同的D型粪链球菌(Enterococcus faecalis),其中降解单宁能力最强的粪链球菌GF1在含单宁4%的培养基上也可以正常生长;Singh[11]从放养山羊瘤胃中分离出16株厌氧单宁降解菌,其中1株菌能够耐受3.5%的单宁酸,并且能将单宁降解为没食子酸和焦棓酸,经分子生物学法鉴定为路德维希肠杆菌(Enterobacter ludwigii)GRT-1。
本试验从采食富含单宁的植物的原生态山羊瘤胃中分离好氧及兼性厌氧的细菌,通过单宁浓度耐受培养基和单宁酶活力鉴定培养基筛选降解单宁的细菌,并通过16S rDNA基因序列测定分析对4株菌进行初步鉴定,再将菌株在单宁浓度为0.5%、1%、1.5%的单宁酶诱导培养基中培养,进行胞内酶活力测定,以期为单宁降解菌在实际生产中应用提供理论基础。……
