竹盐酿造酱油对H2O2诱发LLC-PK1细胞氧化损伤的保护作用
2015-12-13宋家乐李贵节
宋家乐,李贵节,赵 欣,*
(1.桂林医学院公共卫生学院,食品卫生与营养学教研室,广西 桂林 541004;2.重庆第二师范学院,功能性生态食品研究所,重庆 400067;3.重庆第二师范学院生物与化学工程系,重庆 400067)
竹盐酿造酱油对H2O2诱发LLC-PK1细胞氧化损伤的保护作用
宋家乐1,2,李贵节2,3,赵 欣2,3,*
(1.桂林医学院公共卫生学院,食品卫生与营养学教研室,广西 桂林 541004;2.重庆第二师范学院,功能性生态食品研究所,重庆 400067;3.重庆第二师范学院生物与化学工程系,重庆 400067)
目的:研究竹盐酿造酱油乙醇提取物对H2O2诱发猪肾近曲上皮小管细胞(pig proximal tubular cell)LLC-PK1氧化损伤的保护作用。方法:以不同质量浓度(10~200 μg/mL)的竹盐酿造酱油乙醇提取物预培养LLC-PK1细胞24 h后,换用含500 μmol/L H2O2的DMEM细胞培养液继续培养4 h建立细胞氧化损伤模型。四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞生存率,硫代巴比妥酸比色法测定细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,比色法测定细胞内过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性和谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量。结果:经不同质量浓度竹盐酿造酱油乙醇提取物预处理24 h后,受损细胞的生存率上升,细胞内MDA生成量减少,ROS水平显著降低。同时,细胞内抗氧化酶(CAT、SOD和GSH-Px)的活性及其mRNA转录水平,GSH含量也较未经竹盐酿造酱油乙醇提取物处理的受损细胞增加。结论:竹盐酿造酱油乙醇提取物可以通过提高细胞内抗氧化酶系的活性和抗氧化物质GSH的含量而有效地对抗H2O2诱发的LLC-PK1细胞氧化损伤。
竹盐酿造酱油;氧化损伤;抗氧化;LLC-PK1细胞
自由基和活性氧(reactive oxygen species,ROS),例如超氧阴离子(O2—)、过氧根离子(O22—)、羟自由基(・OH)、过氧化氢(H2O2)和过氧亚硝酸根(ONOO—)是生物体在进行有氧呼吸时所产生的一类代谢副产物。……
