肺炎链球菌SPD1587蛋白的表达纯化及晶体生长研究
2015-10-27黄健黄美容骆诗露朱杰华闵迅
黄健黄美容骆诗露朱杰华闵迅
(1.遵义医学院附属医院医学检验科,遵义 563003;2.遵义医学院附属医院输血科,遵义 563003)
肺炎链球菌SPD1587蛋白的表达纯化及晶体生长研究
黄健1黄美容2骆诗露1朱杰华1闵迅1
(1.遵义医学院附属医院医学检验科,遵义 563003;2.遵义医学院附属医院输血科,遵义 563003)
SPD1587蛋白是肺炎链球菌D39菌株中的一种转录因子,其在鼻咽部定植和肺部感染过程中发挥着重要作用。生物信息学分析提示其具有与A群链球菌的转录因子Mga蛋白相似的结构,目前其三维结构尚未被解析。成功构建了SPD1587蛋白的全长表达载体PET28a-spd1587,利用大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行原核表达,获得了以可溶形式表达的目的蛋白。经Ni-NTA柱亲和层析及DEAE阴离子交换层析纯化后,获得了高纯度的目的蛋白。采用悬滴气相扩散法获得了SPD1587蛋白晶体。
肺炎链球菌;SPD1587蛋白;原核表达;晶体生长
肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)是引起细菌性肺炎、中耳炎、脑膜炎等疾病的一种常见致病菌。其在婴幼儿及老年人中具有较高的发病率与死亡率,全世界每年约有160万人死于与S.pn感染相关的疾病[1]。毒力因子在肺炎链球菌致病过程中扮演着较为重要的角色,针对不同的感染局部微环境,其可通过自身转录因子调控荚膜多糖、磷壁酸等重要毒力因子的表达,以利于其建立感染及适应宿主局部微环境[2]。因此,研究肺炎链球菌毒力基因的转录调控机制,对于了解肺炎链球菌逃避宿主防御、建立感染的分子机制有重要意义。
Mga蛋白是A群链球菌中一种重要的转录因子,可调节多种重要毒力基因的表达[3]。……
