屈政 罗磊 杨彬 康新艳

（河南科技大学食品与生物工程学院，洛阳 471023）

响应面优化丙酮粉法提取金银花多酚氧化酶

屈政 罗磊 杨彬 康新艳

（河南科技大学食品与生物工程学院，洛阳 471023）

对丙酮粉法提取金银花多酚氧化酶的工艺进行研究，结果表明，缓冲液pH、料液比、提取时间对PPO比活力影响显著。缓冲液pH与料液比交互作用极其显著，回归模型拟合性良好（R2=99.31%）；影响显著顺序为：静置时间＞缓冲液pH值＞料液比；最优化工艺参数为：缓冲液pH7.5，料液比为1∶120，提取时间为14.5 min。在此条件下，酶比活力为137.389 U/mg。

金银花；多酚氧化酶；丙酮粉；提取；响应面

传统中医理论认为金银花具有清热解毒、疏利咽喉、消暑除烦的功效。新鲜金银花含水量约为80%，颜色嫩绿，但新鲜金银花不利于运输及储存，必须及时干燥。干燥过程极易造成金银花外观颜色严重褐变，同时，其主要功效成分绿原酸和木犀草苷含量明显下降，金银花药用价值损失很大［1］。为探究金银花在干燥过程中酶促褐变的机理，有必要提取分离高纯度的PPO作酶学性质的相关研究。

目前，PPO提取方法有匀浆法和丙酮粉法。匀浆法操作简单，所得酶液活性较强，但多酚类物质残留量较高，酶液纯度偏低。丙酮粉法主要是通过丙酮使细胞膜的磷脂结构破坏，从而改变细胞膜的通透性，再经过提取可使膜结合的PPO或胞内的PPO释放出胞外。相对于匀浆法而言，其酶粉活性尚可、体积小且便于贮存，可直接应用［2］。田玉庭［3］曾用丙酮粉法提取澳洲青苹PPO，经初步纯化后，SDS-PAGE凝胶电泳检测仅显示一条电泳带。……