董　曦，孙桂波，罗　云，孙晓波，陈素红

(1.温州医科大学药学院，浙江温州　325035;2.中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所，北京　100193)



异鼠李素对H2O2引起的H9C2细胞氧化应激损伤的保护作用研究

董曦1，孙桂波2，罗云2，孙晓波2，陈素红1

(1.温州医科大学药学院，浙江温州325035;2.中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所，北京100193)

摘要:目的探讨异鼠李素对氧化应激诱导的心肌细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法用MTT实验确定异鼠李素的心肌细胞毒作用浓度，以及抗H2O2氧化应激损伤的最佳作用浓度。将实验组分为正常组、模型组、治疗组、单给药组。治疗组、单给药组均用最佳浓度的异鼠李素预孵育12 h，模型组、治疗组在预孵育结束后用300 μmol·L(－1)H2O2作用4 h，模拟心肌细胞的氧化应激损伤。利用流式细胞术检测心肌细胞凋亡细胞比例、ROS产生等指标，利用荧光显微镜检测细胞的线粒体膜电位去极化，利用荧光酶标仪检测抗氧化酶与氧化产物MDA产量，利用Western blot检测线粒体凋亡信号通路与Nrf2/ARE信号通路的相关蛋白表达。结果与正常组相比，单给药组心肌细胞的凋亡细胞比例，ROS产生，线粒体膜电位去极化，细胞质细胞色素C、caspase-9、caspase-3、Bcl-2、Bax表达，抗氧化酶与氧化产物MDA产量差异均无显著性(P＞0.05) ;与模型组相比，治疗组心肌细胞凋亡比例明显降低(P＜0.01)，ROS产生明显降低(P＜0.05)，线粒体膜电位去极化明显改善(P＜0.01)，细胞质细胞色素C、caspase-9、caspase-3、Bax表达明显降低(P ＜0.01)，Bcl-2表达增加(P＜0.01)，抗氧化酶表达增加(P ＜0.01)，氧化产物MDA表达降低(P＜0.01) ;心肌细胞中Nrf2核转位与HO-1表达均随着异鼠李素预孵育时间的延长而增加。……