赵青春，沈　洪，程海波，朱　磊，李沐涵

(1.南京中医药大学第一临床医学院，江苏南京　210046;2.江苏省中医院消化内科，江苏南京　210029)

Effect of Qingchang Huashi Recipe on IL-6/JAK2/STAT3 pathway in HT-29 cells>

ZHAO Qing-chun1，SHEN Hong2，CHENG Hai-bo1，ZHU Lei2，LI Mu-han1(1.the First Clinical Medical School，Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210046，China;2.Dept of Gastroenterology，Jiangsu Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine，Nanjing 210029，China)



清肠化湿方对HT-29细胞IL-6/JAK2/STAT3的影响

赵青春1，沈洪2，程海波1，朱磊2，李沐涵1

(1.南京中医药大学第一临床医学院，江苏南京210046;2.江苏省中医院消化内科，江苏南京210029)

Effect of Qingchang Huashi Recipe on IL-6/JAK2/STAT3 pathway in HT-29 cells>

ZHAO Qing-chun1，SHEN Hong2，CHENG Hai-bo1，ZHU Lei2，LI Mu-han1
(1.the First Clinical Medical School，Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210046，China;2.Dept of Gastroenterology，Jiangsu Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine，Nanjing 210029，China)

关键词:清肠化湿方;溃疡性结肠炎; HT-29; IL-6; JAK2; STAT3

Key words:Qingchang Huashi Recipe; ulcerative colitis; HT-29; IL-6; JAK2; STAT3

沈洪(1959－)，男，博士，教授，主任医师，博士生导师，研究方向:消化道疾病，通讯作者，E-mail: shenhong999@ 163.com

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是一种反复发作的肠道慢性非特异性炎症性疾病，发病机制尚未明确，细胞因子IL-6及其介导的信号通路在非可控性肠道炎症过程中起关键作用［1］。导师沈洪教授所拟清肠化湿方(QHR)，治疗轻、中度UC，取得良好效果［2］。课题组前期研究表明该方能调控UC大鼠NF-κB/COX-2通路、PPAR-γ/NF-κB及Toll通路，减少IL-1β、TNF-α等促炎因子分泌，促进抑炎因子IL-10分泌等。本实验在此基础上，以TNF-α、LPS共刺激诱导HT-29细胞炎症模型，观察清肠化湿方对IL-6及其主要信号转导通路之一JAK2/STAT3的影响，进一步探讨其作用机制。

1　材料与方法

1.1实验材料HT-29，购自中国科学院细胞库。清肠化湿方(黄连、黄芩、煨木香等购自江苏省医药公司，生产批号20121201)。柳氨磺胺吡啶(Sulfasalazine，SASP)、McCoy's5a培养基、LPS: Sigma公司;胎牛血清(Gibco公司) ; Recombinant Human TNF-α(Pepro Tech公司)。人IL-6 ELISA试剂盒(EB公司) ;引物由上海生工合成; Real Time PCR试剂盒(TaKaRa公司) ;兔抗p-JAK2、p-STAT3单抗(Cell Signaling Technology公司)。酶标仪、电泳仪、转膜仪、Western blot曝光仪购自美国Bio-Rad公司; Real Time PCR仪(TaKaRa) ; UVP凝胶成像系统(UVP公司)。

1.2清肠化湿方水煎剂制备称取清肠化湿方1付，共87 g，煎煮、蒸发、减压浓缩至27 ml母液，4℃保存。

1.3实验分组取指数生长期HT-29细胞，分?为6组:对照组:加入不含FBS的McCoy's 5a孵育24 h;模型组……