王 珣，于红刚，王明林，周立云，胡义奎

(武汉市武昌医院，武汉430000)

急性重症胰腺炎(SAP)治疗效果差，病死率高达25%，严重威胁人们的健康。目前认为，微循环障碍是SAP病情进展的一个重要因素［1～3］，其中血栓素(TXA2)及前列环素(PGI2)在微循环障碍中起非常重要的作用［4～7］。贝前列素钠为 PGI2的衍生物，能调节血管张力、抑制血小板聚集、维持组织血流，通过升高cAMP水平、抑制Ca2+内流及TXA2生成，起到改善微循环的作用［8］，目前已被用于慢性血管闭塞性疾病的治疗。2011年5月～2012年5月，本研究初步探讨了贝前列素钠对 SPA大鼠TXA2、PGI2的影响，旨在为贝前列素钠用于临床治疗SAP提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料 SD大鼠60只，体质量(300±20)g，雌雄各半，由武汉大学动物实验中心提供。淀粉酶试剂盒(南京建成生物公司)，放射免疫试剂盒(北京科美东雅生物公司)。

1.2 方法

1.2.1 动物模型建立 按文献［9］方法建立SAP模型。实验前12 h禁食，不禁饮。大鼠腹腔注射盐酸氯胺酮麻醉，逆行胰胆管内加压注射5%牛磺胆酸钠建立SAP模型。

1.2.2 分组及干预 将大鼠随机分为5组，A组系正常大鼠，翻动十二指肠、胰腺后关闭腹腔，腹腔注射生理盐水;B组为急性SAP造模后大鼠，腹腔注射生理盐水干预;C组为造模后大鼠，腹腔注射贝前列素钠10 μg/kg干预;D组为造模后大鼠，腹腔注射贝前列素钠20 μg/kg干预;E组为造模后大鼠，腹腔注射贝前列素钠30 μg/kg干预。5组均于术后第6、12 h分两批麻醉后行腹主动脉放血法处死，取其血浆和胰腺病理标本。部分组织以10%中性甲醛固定，部分组织液氮冻存备用。

1.2.3 TXA2/PGI2检测 由于 TXA2和 PGI2在体内极不稳定，难以直接测定，故通过放射免疫分析法分析血浆中两者稳定的代谢终产物TXB2和6-Keto-PGF1α，将此作为TXA2和PGI2水平的指标。

1.2.4 血清淀粉酶检测 采用CNPG3法检测。从低温冰箱中取出装有胰腺组织的EP管，于室温放置30 min后称重(M1)，打开EP管盖，于90℃烤箱烘烤24 h后再次称重(M2)，去除管中胰腺组织后称量空管质量(M3)，以组织湿质量(M1-M3)/干质量(M2-M3)表示胰腺组织含水量。

1.2.5 病理检查 按照文献［10］方法从胰腺水肿、坏死、出血、炎性浸润4个方面进行评分，每个项目计分分别为 0、0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4 分。

1.2.6 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件，计量资料以±s表示，正态资料行单因素方差分析;病理评分为非正态资料，用中位数表示，比较行秩和检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组不同时间血淀粉酶、TXA2/PGI2比较 见表1。

表1 各组不同时间血淀粉酶、TXA2/PGI2比较(±s)

表1 各组不同时间血淀粉酶、TXA2/PGI2比较(±s)

注:不同时间各组间比较，P均＜0.05

组别 n 血淀粉酶(U/L) TXA2/PGI 2 A组12 6 h 2 883.01 ±692.35 1.15 ±0.08 12 h 2 792.00 ±688.44 1.16 ±0.10 B组 12 6 h 15 047.24 ±662.09 2.11 ±0.12 12 h 16 047.34 ±702.05 2.62 ±0.13 C组 12 6 h 11 099.57 ±714.13 2.08 ±0.14 12 h 10 087.20 ±654.63 1.87 ±0.06 D组 12 6 h 11 808.93 ±804.39 1.99 ±0.11 12 h 8 808.91 ±776.75 1.78 ±0.09 E组 12 6 h 12 106.33 ±699.84 1.84 ±0.07 12 h 8 711.25 ±712.56 1.62 ±0.10

2.2 各组病理评分比较 A、B、C、D、E组6 h胰腺标本病理评分分别为 0.82、8.72、7.05、6.77、5.26分，12 h 分别为 0.84、13.72、9.21、8.54、6.05 分，B组各时间点胰腺标本病理评分高于A组，C、D、E组低于B组，且呈剂量依赖性(P均＜0.05)。

3 讨论

研究表明，胰腺微循环障碍不仅是SAP的始动因素，而且贯穿于SAP发展的全过程，更是SAP的一个重要恶化因素。SAP时机体产生大量炎症介质，包括 TXA2和PGI2。TXA2是极强的血管收缩剂，其可诱导血小板释放、聚集，引发凝血障碍，使胰腺组织缺血加重，形成恶性循环。PGI2是血管扩张剂，能强烈舒张血管和抑制血小板聚集，是TXA2最强的生理拮抗剂。TXA2和PGI2是一对血管张力调节介质，其平衡失调将使胰腺血管舒缩功能失调、血栓形成、微循环障碍，最终影响胰腺组织灌注，导致胰腺坏死。因此，TXA2/PGI2相对平衡对SAP的转归尤为重要，积极改善微循环障碍可能是治疗SAP的一个新的靶点［11～16］。

目前，改善胰腺微循环的药物少，疗效不确切。贝前列素钠作为新型的具有抗血小板和扩血管作用的PGI2衍生物，主要用于糖尿病周围神经病变及外周血管病的治疗，并取得良好效果。有研究表明，贝前列素钠对肺动脉高压疾病的TXA2、PGI2变化有重要影响。日本关于抗凝血药的论述中也评价了贝前列素钠可改善微循环。本研究结果显示，SAP时，6、12 h TXA2/PGI2、淀粉酶、病理评分均增高，贝前列素钠干预后各指标均降低，并呈剂量依赖性。提示贝前列素钠可能通过降低TXA2/PGI2、淀粉酶而减轻SAP时的胰腺损伤，并随剂量增大而抗损伤作用越强，为其用于临床治疗SAP提供了理论依据。

［1］Wu SD，Zhang ZH，Li DY，et al.Nitroester drug's effects and their antagonistic effects against morphine on human sphincter of Oddi motility［J］.World J Gastroenterol，2005，11(15):2319-2323.

［2］Sudhindran S，Bromwich E，Edwards PR.Prospective randomized double-blind placebo-controlled trial of glyceryl trinitrate in endoscopic retrograde cholangiopancreatography-induced pancreatitis［J］.Br J Surg，2001，88(9):1178-1182.

［3］Doctor N，Agarwal P，Gandhi V.Management of severe acute pancreatitis［J］.Indian J Surg，2012，74(1):40-46.

［4］Moretó M，Zaballa M，Casado I，et al.Transdermal glyceryl trinitrate for prevention of post-ERCP pancreatitis:A randomized double-blind trial［J］.Gastrointest Endosc，2003，57(1):1-7.

［5］Watanabe H，Ueda T，Miura M.Thromboxane a2(TXA2)，thromboxane B2(TXB2)［J］.Nihon Rinsho，2010，68(Suppl 7):33-37.

［6］Xavier FE，Blanco-Rivero J，Sastre E，et al.Simultaneous inhibition of TXA(2)and PGI(2)synthesis increases NO release in mesenteric resistance arteries from cirrhotic rats［J］.Clin Sci(Lond)，2010，119(7):283-292.

［7］Yao HX，Huang L，Lin LE，et al.The study of relationship between platelet function and thrombus in patients with essential thrombocythaemia［J］.Zhonghua Yi Xue Za Zhi，2010，90(4):253-255.

［8］Takahashi M，Shiba T，Hirano K，et al.Acute decrease of cardioankle vascular index with the administration of beraprost sodium［J］.J Atheroscler Thromb，2012，19(5):479-484.

［9］黄骞，全竹富，石群立.逆行胰胆管注射制备改良的大鼠急性坏死性胰腺炎模型［J］.医学研究生学报，2005，18(7):661-662，670.

［10］金魁，刘宝，周树生，等.高压氧对急性胰腺炎大鼠T淋巴细胞亚群及胰腺组织病理变化的影响［J］.中国危重病急救医学，2010，22(9):525-527.

［11］ Fang BJ，Gao PY，He SH，et al.Clinical early intervention of Tongxia Huayu Decoction on pancreatic microcirculatory disturbance in severe acute pancreatitis［J］.Zhong Xi Yi Jie He Xue Bao，2007，5(2):134-136.

［12］Cuthbertson CM，Christophi C.Disturbances of the microcirculation in acute pancreatitis［J］.Br J Surg，2006，93(5):518-530.

［13］Strate T，Mann O，Kleinhans H，et al.Microcirculatory function and tissue damage is improved after therapeutic injection of bovine hemoglobin in severe acute rodent pancreatitis［J］.Pancreas，2005，30(3):254-259.

［14］Meng H，Gong J，Fang L，et al.Effect of interferon-γ on NF-κB and cytokine IL-18 and IL-27 in acute pancreatitis［J］.Bosn J Basic Med Sci，2013，13(2):114-118.

［15］Trumbeckaite S，Kuliaviene I，Deduchovas O，et al.Experimental acute pancreatitis induces mitochondrial dysfunction in rat pancreas，kidney and lungs but not in liver［J］.Pancreatology，2013，13(3):216-224.

［16］Howard TJ.The role of antimicrobial therapy in severe acute pancreatitis［J］.Surg Clin North Am，2013，93(3):585-593.