何枝生 匡裕康 陈爱会 阴兵林 谢 梅 王东升 黄 建 郭昌莹 程效良 王欢元

2007年4月2013年8月，我们将96例食管癌手术切除患者术中胸腔冲洗液行细胞学检查及DNA倍体分析，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

96例均为我科2007年4月至2013年8月收治的行手术治疗的食管癌患者，男性为71例，女性为25例，平均年龄为62.9岁。行左颈左胸二切口57例；左颈右胸腹正中三切口21例，右胸腹正中二切口8例，单纯左开胸10例。

1.2 仪器和试剂

流式细胞仪为美国BCKMAN COULTER公司产品，DNA stain kit 为美国BCKMAN COULTER公司产品，免洗溶血素。

1.3 方法

开胸后即注入生理盐水300 ml，用手轻轻搅拌，使生理盐水与脏、壁层胸膜及纵膈胸膜充分接触，特别注意肋膈角及胸腔顶部，用盐水反复冲刷，同时将手术床调成头高脚底位，用特制的小勺子将胸腔冲洗液取出，尽量避免使用注射器，以免细胞被破坏；同时开胸时止血，尽量减少冲洗液中的红细胞，以免影响细胞学检查结果；取出的胸腔冲洗液分成AB两瓶，A瓶送细胞学检查，B瓶送DNA倍体分析。将A瓶中胸腔冲洗液离心，3 000转/min,每次3 min，共2～3次，弃去上清液，沉淀物2～4张，及时固定，HE染色，光镜下观察脱落细胞的形态。流式细胞仪测定DNA含量：800～1 000 r/min离心沉淀收集到的胸腔冲洗液，如为血性液体，用37 ℃预温过的溶血剂溶解红细胞，用pH 7.4 0.01 mol/L PBS洗涤2次，350目的滤网过滤除去细胞团块，将细胞数调整至106个/ml；按照DNA stain Kit st说明书进行染色和固定，即时应用流式细胞仪检测；不能即刻上机检测的，用终浓度为70%的酒精固定，4 ℃冰箱保存，上机前再染色固定。

2 结果

96例食管癌中细胞学检查9例找到癌细胞，流式细胞仪检测发现21例异倍体。……