扶肾降浊方含药血清对肾小管间质损害大鼠成纤维细胞TGF-β1/Smads信号转导通路的影响*
2014-08-13李春雨苏玮莲魏晓露李国霞
李春雨, 苏玮莲, 魏晓露, 李国霞
(天津医科大学国际医学院,天津 300070)
肾小管间质损害是肾小球肾炎由炎症启动进展至肾小球硬化的中间环节,肾小球肾炎进展至肾小球硬化,大多已不可逆转,而对其中间环节即肾小管间质损害进行早期有效干预则可大大延缓肾小球肾炎进展,对防治慢性肾脏疾病具有重要意义[1-2]。扶肾降浊方在临床广泛用于慢性肾脏疾病的治疗,多年的临床实践表明,总有效率达82.5%[3]。动物实验表明,扶肾降浊方能改善慢性肾功能衰竭大鼠的常规生化指标,延缓肾衰的病理进程[4]。但对肾小管间质损害的保护作用机制尚不十分清楚。本文采用血清药理学的研究方法,基于转化生长因子-β1(transforming growth factor β1, TGF-β1)/Smads信号转导通路,从体外细胞实验角度,探讨扶肾降浊方对系膜增生性肾小球肾炎(mesangial proliferative glomerulonephritis, MsPGN)肾小管间质损害的保护作用机制。
材 料 和 方 法
1 药物与试剂
扶肾降浊方组成:山茱萸12 g,生黄芪30 g,白花蛇舌草30 g,丹参30 g,鬼箭羽30 g,益母草30 g,实验所用中药制剂为天津中医药大学中药学院按既定工艺制备的配方颗粒,每克含生药4.06 g,批号:20120810;葡萄球菌肠毒素B由军事医学科学院微生物流行病研究所提供;完全弗氏佐剂和不完全弗氏佐剂为Sigma产品;牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)为Amresco产品;Trizol reagent、反转录试剂盒和实时荧光定量PCR试剂盒均购自天根生化科技有限公司;全蛋白抽提试剂盒、SDS-PAGE试剂盒、Western blotting检测试剂盒和ECL化学发光底物试剂盒均购自南京凯基生物科技发展有限公司。
2 动物
雄性Wistar大鼠20只,体重(150±10)g,由中国人民解放军军事医学科学院卫生学环境医学研究所提供,合格证号为SCXK(军)2009-003。……
