徐春艳， 赵林双

(广州军区武汉总医院内分泌科，湖北 武汉 430070)

血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体(angiotensin Ⅱ type 1 receptor autoantibody，AT1-AA)属于G蛋白偶联受体家族，是针对AT1受体(AT1receptor，AT1R)的特异性抗体，具有类似血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ，AngⅡ)的生物学效应。自AT1-AA首次在先兆子痫患者体内被发现[1]以来，又先后证实其与难治性高血压患者蛋白尿发生率有关[2]，并参与了原发性肾小球疾病过程[3]，成为独立于高血压之外的致肾脏损害的因素。本课题组前期研究发现，糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)患者血清AT1-AA阳性率明显高于糖尿病患者和正常对照者[4]，提示AT1-AA与DN发病过程有关，但其致DN肾脏损害的具体机制尚不清楚。

研究显示，DN时肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system, RAS)的活化可引起肾脏内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ERS)，并可通过JNK凋亡途径诱导肾脏细胞凋亡[5-6]。AT1R是RAS的关键因子，也是AT1-AA发挥效应的特异性受体，但其能否介导AT1-AA而致DN肾脏ERS反应，目前未见报道。因此，我们通过本研究探讨DN大鼠血清AT1-AA与肾脏ERS及其相关的JNK凋亡信号通路的关系，以进一步了解AT1-AA致DN肾脏细胞凋亡的分子机制。

材 料 和 方 法

1 实验动物

36只4周龄雄性SD大鼠，购自武汉大学动物实验中心，实验动物合格证编号为42000500001559。饲养环境：室温20～24 ℃，相对湿度40%～60%，自由摄食饮水，12 h交替照明。

2 主要试剂和仪器

链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)(Sigma)；TUNEL试剂盒(Promega)；BCA蛋白定量试剂盒(碧云天生物技术有限公司)；葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78， GRP78)抗体(Bioworld);磷酸化c-Jun N末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)抗体(Santa Cruz)；β-actin抗体、羊抗小鼠Ⅱ抗、羊抗兔Ⅱ抗和兔抗小鼠Ⅱ抗(武汉博士德生物工程有限公司)。全自动生化仪(BECKMAN COULTER UniCelDxC 800)；HMIAS-2000高清晰度彩色医学图文分析系统(广州军区武汉总医院医学实验科提供)。……