林志鸿, 谢良地, 吴可贵, 李庚山, 蔺佩鸿

(福建医科大学 1附属第一医院急诊科， 2附属第一医院干部病房, 3福建省高血压研究所，福建 福州 350005； 4武汉大学人民医院心内科，湖北 武汉 430000)

血管损伤后血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)的过度增殖及随后的细胞外基质(extracellular matrix, ECM)沉积在血管损伤后的再狭窄过程中扮演着至关重要的作用。血管损伤后，VSMCs许多特征与高血压时的VSMCs相似，表现为明显的生长合成表型、更快的生长速度、异常的生长接触抑制及加速进入S期的细胞生长周期。同时对许多生长因子呈现出非特异性的高增殖倾向[1]。既往研究表明，血管损伤后转化生长因子β1(transforming growth factor β1，TGF-β1)的表达水平明显升高，且TGF-β1显著促进了血管损伤后VSMCs的异常增殖，促进了ECM的合成及在损伤血管内膜的堆积[2-3]。因此抑制损伤血管局部TGF-β1的高表达，将可能显著抑制VSMCs的异常增殖及ECM在损伤血管内膜的堆积，从而减轻血管损伤后内膜的增殖和肥厚。

材 料 和 方 法

1 反义寡核苷酸的设计及合成

应用Wilbar-Lipman方法，寻找出大鼠TGF-β1的cDNA序列[4]，在跨过cDNA序列的起始密码区ATG范围内，设计包含有15个碱基、无修饰或硫代磷酸化修饰的反义TGF-β1寡核苷酸，同时设计与此反义寡核苷酸相对应的、作为对照的正义寡核苷酸(与反义寡核苷酸互补)，无修饰的寡核苷酸应用于离体的细胞培养实验，而硫代磷酸化修饰的寡核苷酸则用于在体治疗实验。具体如下：反义 TGF-β1(AS TGF-β1): 5’-CGAGGGCGGCATGGG-3’；正义TGF-β1(S TGF-β1): 5’-GCTCCCGCCGTACCC-3’。上述所有的寡核苷酸均采用Model 394 DNA Synthesizer (Applied Biosystems)合成，应用OPC column(Applied Biosystems)纯化。

2 Sprague-Dawley(SD)大鼠颈总动脉内膜球囊损伤

体重约……