张晓兰 邢铃 张志钢 杨鸣 吴红玉 满晓华 金晶 李兆申 金震东

神经浸润(perineural invasion ，PNI)是胰腺癌的典型表现，其发生率为50%～100%。PNI亦是肿瘤细胞侵犯周围神经及转移扩散的途径之一，疼痛的产生也与PNI密切相关。PNI的发生预示着胰腺癌的局部复发及胰腺癌患者较差的预后[1]，但其发病机制目前仍未明确。由于缺乏有效的体内实验模型，既往针对PNI发病机制的研究多局限于体外实验。本研究建立有效的PNI体内模型，模拟肿瘤细胞浸润神经时的体内微环境，为PNI发病机制的研究提供一定的实验基础。

材料与方法

一、细胞培养

人胰腺癌细胞株CAPAN-2、PANC1及SW1990均购自美国ATCC(American Type Culture Collection)，按照ATCC推荐的培养条件培养、传代，取对数生长期细胞，收集于1.5 ml EP管中备用。

二、实验动物及分组

4～5周龄BALB/c裸小鼠32只，体质量18～22 g，购自上海中科院斯莱克动物中心，于第二军医大学动物实验中心SPF级屏障系统饲养。饲养条件：室温26～28℃，相对湿度40%～60%，动物饲养箱置于层流架中，饮用水、饲料及垫料均经严格消毒，定期更换，专人管理。入室适应性喂养1周后开始实验。按完全随机法分为4组，其中3组分别接种CAPAN-2、PANC1、SW1990细胞，不做任何处理的裸鼠为对照组，每组8只。

三、造模方法

BALB/c裸小鼠称重后用1%戊巴比妥按照40 mg/kg体质量剂量腹腔注射麻醉。待麻醉完全后，消毒裸鼠右下肢，在其股骨头下约1～2 mm处沿股骨干走行方向切一3～4 mm的小切口，钝性沿肌肉走行轻轻剥离肌肉，找寻并暴露坐骨神经，在坐骨神经周围分别注射约106个胰腺癌细胞(图1)，缝合切口。术后自由进食、水。动态观察成瘤情况、成瘤时间。……