梁志海 唐国都 方春芸 覃蒙斌

重症急性胰腺炎(server acute pancreatitis, SAP)患者早期病情变化迅速、病死率高，虽然近年SAP的治疗手段有很大进步，但寻找早期干预疾病进程、减少疾病重症化仍是本领域的研究热点之一。生长激素释放肽-2(growthhormone releasing peptides，GHRP-2)是ghrelin受体激动剂，它可以减轻肝脏炎症、急性肺损伤[1-2]，而且外源性ghrelin对急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)的炎症反应有抑制作用[3]，但内源性ghrelin与AP发病机制的关系未明确。本研究观察GHRP-2干预急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis, ANP)大鼠后内源性ghrelin表达的变化。

一、材料与方法

1．实验动物及分组：健康雄性SD大鼠，12周龄，体质量250～350 g，清洁级，购自广西医科大学实验动物中心。按数字表法随机分为假手术组、ANP组、GHRP-2组，每组30只。大鼠造模前禁食12 h，自由饮水。采用胆胰管逆行注射2%牛磺胆酸钠(日本TCI公司)1 ml/kg体质量的方法制备ANP模型。GHRP-2组在制模前30 min给予腹腔注射GHRP-2(杭州中肽公司)200 g/kg体质量；ANP组制模前30 min注射等容积生理盐水。对照组仅剖腹翻动胰腺。术后3、6、12、24、48 h分批处死大鼠，每时点每组处死6只。采血分离血清，置-80℃冰箱保存备用。取胰腺组织，部分放入RNA保存液(广州东盛公司)中置液氮保存备用，部分用10%甲醛液固定。

2．胰腺组织病理学检查及评分：固定的胰腺组织常规切片、HE染色。由病理科医师盲法读片，并参考Schmit标准[4]从水肿、出血、坏死、炎症4个项目进行评分，每个项目由轻到重共分5级，分别计0～4分，4个项目评分之和作为总的病理评分，最高16分。

3．血清淀粉酶活性检测：送广西医科大学第一附属医院检验科使用全自动生化分析仪检测。

4．血清ghrelin、IL-1β水平检测：采用ELISA法检测。……