姜勇，吕学娜，安玉枝，王锡青

(圣元营养食品有限公司，山东 青岛266400)

0 引 言

双歧杆菌 (Bifidobacterium)是人体肠道内数量最多、功能最重要的益生菌，革兰氏阳性、无芽胞，通过定植于肠黏膜上皮细胞表面，形成一个生物学屏障，阻止和抑制各种致病菌与条件致病菌在肠道的定植、入侵和生长繁殖[1]。阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)是一种有周生鞭毛、能运动、无芽孢、兼性厌氧的革兰氏阴性致病菌。新生儿感染该菌可导致脑膜炎、坏死性小肠结肠炎和菌血症，感染引起的死亡率高达50%以上[2，3]。目前国家婴儿配方食品标准GB 10765中规定阪崎肠杆菌的限量为0/100g[4]，指定的检测方法为GB 4789.40[5]；对添加活性菌种的产品规定为活性益生菌数应≥106CFU/g(mL)[4]。有文献报道益生菌对肠道致病菌有抑制作用[6，7]，其作用机理主要在于竞争性抑制或生长代谢过程中产生某些抑菌物质[8-10]。本研究的目的在于考察按照GB 4789.40检测阪崎肠杆菌，双歧杆菌的存在是否会影响检测结果；在证实抑制作用存在后，对检测方法进行了改进。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

原料A：双歧杆菌(BI-07，1011g-1)；样品A：婴儿配方奶粉(添加BI-07，107g-1)；样品B：婴儿配方奶粉(与样品A的差别仅在于未添加BI-07)。阪崎肠杆菌标准菌株(ATCC 51329)，缓冲蛋白胨水(BPW)，改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(mLST)，阪崎肠杆菌显色培养基，胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)，MRS培养基，营养肉汤，万古霉素，莫匹罗星锂盐。API 20 E肠杆菌和其他革兰氏阴性杆菌鉴定系统。

1.2 仪器与设备

TG16-WS台式高速离心机，BBL CrystalTMSpec比浊计，LRH-150F生化培养箱。

1.3 方法

1.3.1 阪崎肠杆菌的检测

按GB 4789.40进行阪崎肠杆菌的检测[5]，检测程序如图1所示。……