王静，赵宁，李萌，张艳杰，张书义，滕国新，宋真，刘宁,，许晓曦

(1.东北农业大学 a.食品学院，b.乳品科学教育部重点实验室，哈尔滨 150030；2.黑龙江省乳品工业技术开发中心，哈尔滨 150028；3.上海晨冠乳业有限公司，上海 201401；4.全国畜牧总站，北京 100125； 5.北京城市学院，北京100094)

0 引 言

牛乳铁蛋白素(Bovine Lactoferrcin，LfcinB)是牛乳中的乳铁蛋白在酸性环境条件下经胃蛋白酶作用从N端释放的一段多肽[1]，除了不能促进铁的吸收外，完全具备乳铁蛋白生物活性[2]，可用于保健食品、药品中，作为营养强化剂并能提高人的免疫力，有抗癌的作用[3]，且在其发挥抗癌作用浓度范围内对人正常细胞活性没有影响[1]。因此，LfcinB在抗肿瘤方面有相当大的潜力。

目前关于LfcinB抗肿瘤作用研究多集中于其诱导肿瘤细胞凋亡作用[4]，从增殖周期和分化抗原表达水平来探讨LfcinB对肿瘤细胞的抑制增殖、诱导分化作用国内还少有报道。本研究采用流式细胞术分析LfcinB对Jurkat细胞增殖、分化的影响，为进一步深入研究LfcinB抑制白血病细胞增殖、诱导细胞分化的分子机理及其在食品中的应用开发奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

Jurkat细胞，LfcinB，RNA酶，RPMI1640培养基，无支原体胎牛血清，二甲基亚砜(DMSO)，NBT，雷帕霉素，CCK-8试剂盒，碘化丙啶，FITC标记的鼠抗人CD11b抗体。

1.2 细胞培养及处理

将细胞在含有10%热灭活胎牛血清的RPMI1640完全培养基中悬浮培养，并置于37℃质量分数为5%的CO2，相对饱和湿度的孵育箱中培养。取对数生长期细胞，加入一定浓度梯度的LfcinB处理细胞，LfcinB的质量浓度梯度为50，100，200 mg/L和400 mg/L， 阳性对照组培养液中仅加100 nmol/mL的雷帕霉素(RAPA)，以未加LfcinB刺激的对数生长期Jurkat细胞为空白对照组。……