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山羊乳酪蛋白酶解条件优化及其抗菌活性研究

2014-07-13苏晋文李志成任娇郝洁付芒娟

中国乳品工业 2014年5期

苏晋文,李志成,任娇,郝洁,付芒娟

(西北农林科技大学 食品科学与工程学院,陕西 杨凌712100)

0 引 言

抗菌肽是存在于生物体内能抵抗外界微生物侵害,消除体内突变细胞的一类由基因编码或经大分子蛋白质水解产生的小分子多肽[1],具有广谱抗细菌、真菌、病毒、和寄生虫的活性,且不易产生耐药性[2-3],是一类具有巨大发展潜力的新型抗菌物质。

乳酪蛋白在酶解过程中可以产生多种生物活性肽[4-5],在牛乳酪蛋白酶解物中已经发现多种抗菌肽[6-8]。山羊乳是北方仅次于牛乳的第二大乳源,山羊乳酪蛋白和牛乳酪蛋白在蛋白质质量分数、氨基酸序列等方面存在较大差异[9-11],以山羊乳酪蛋白为原料同样能获得多种活性肽[12-13]。目前对山羊乳酪蛋白抗菌肽的研究鲜见报道。本研究以山羊乳酪蛋白为原料,探索山羊乳酪蛋白抗菌肽的最适酶解条件,为山羊乳的高值化利用提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

无抗山羊乳,购于西北农林科技大学畜牧场;沙门氏菌(Salmonella LT2)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 26111)、大肠杆菌(Escherichia coli ACTT25922),西北农林科技大学食品科学与工程学院保存。

考马斯亮蓝G-250,胰蛋白酶(80 000 U/g),碱性蛋白酶(8 000 U/g),木瓜蛋白酶(40 000 U/g),中性蛋白酶(40 000 U/g),胃蛋白酶(3 000~3 500 U/g);其他试剂均为国产分析纯。

1.2 仪器与设备

UV-1700双光束紫外光分光光度计,PK121R型低温冷冻离心机,水浴锅,SB5200DT超声清洗机,ES315高压蒸汽灭菌锅,PYX-DHS-40×50-BS-П隔水式恒温培养箱(HES-380);SW-CJ-1F超净工作台。

1.3 乳酪蛋白制备

新鲜无抗山羊乳4℃条件下,5 000 r/min离心20 min脱脂,离心后的溶液用浓度为2 mol/L的HCl溶液调节pH值至……

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